Summary
A modification of the radioimmunoassay for insulin (method ofHales andRandle) is described. Separation of precipitated/antibody-bound insulin from free insulin was achieved by centrifugation instead of filtration. Addition of a carrier-immunoprecipitate relatively diminished possible losses by decantation during the washing steps. Sensitivity (10 μU/ml), precision (λ= 0.067–0.314) and reproducibility are comparable with some other published data. The modification avoids the difficulties due to the filtration procedure in the use of commercially available test-kits for the radioimmunoassay of insulin.
Résumé
La méthode deHales etRandle du dosage radioimmunologique de l'insuline a été modifiée. La séparation du complexe précipité (insuline anticorps) de l'insuline libre a été effectuée par centrifugation au lieu de la filtration. L'addition d'un immunoprécipité transporteur diminue l'importance des pertes pendant le lavage du précipité. La sensibilité (10 μU/ml), la précision (λ=0.067–0.314) et la reproductibilité permettent une comparaison favorable avec des résultats publiés dans la littérature. La modification permet d'utiliser des combinaisons commercialisées pour le dosage radioimmunologique de l'insuline tout en évitant les difficultés que peut poser la séparation «B/F» par la filtration.
Zusammenfassung
Es wird eine Modifikation der radioimmunologischen Insulinbestimmung nachHales undRandle angegeben. Die Trennung von präzipitiertem/antikörpergebundenem und freiem Insulin wird nicht durch Filtration, sondern durch Zentrifugation vorgenommen. Durch Zusatz eines Träger-Immunopräzipitates wird eine Präzipitatmenge erzielt, die groß genug ist, um den Einfluß eventueller Verluste während des Waschens und Dekantierens genügend klein zu halten. Sensibilität (10 (μE/ml), Genauigkeit (λ=0.067–0.314) und Reproduzierbarkeit erlauben einen zufriedenstellenden Vergleich mit entsprechenden Angaben der Literatur. Die Modifikation ermöglicht die Benutzung käuflich erhältlicher Testkombinationen zur radioimmunologischen Insulinbestimmung unter Vermeidung der Schwierigkeiten, die häufig bei der Benutzung der Filtration für die B/F-Trennung auftreten.
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Ich danke Herrn Prof. Dr. G.Fuchs (Direktor de Institutes für Med. Statistik und Dokumentation) für wertvolle Hilfe bei den statistischen Berechnungen.
Die Farbwerke Hoechst AG, Frankfurt/Main, stellten freundlicherweise kristallines Rinder- und SchweineInsulin zur Verfügung.
Die Arbeiten wurden mit technischer Hilfe von FräuleinInge Quitzow und FräuleinKarin Dolatkowski durchgeführt.
Die Untersuchungen wurden durch die Deutsche Forsehungsgemeinschaft gefördert.
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Quabbe, H.J. Modifikation der radioimmunologischen Insulinbestimmung nach Hales und Randle. Diabetologia 5, 101–107 (1969). https://doi.org/10.1007/BF01212004
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DOI: https://doi.org/10.1007/BF01212004