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Biophysik

, Volume 7, Issue 2, pp 120–125 | Cite as

Vorläufige Ergebnisse von Untersuchungen an eingefrorenen und bei tiefen Temperaturen bestrahlten Lymphozyten

I. Der Einfluß der Abkühlgeschwindigkeit, der Endtemperatur und der Kulturdauer auf eingefrorene und tiefgekühlte Lymphozytenkulturen
  • R. E. Grillmaier
Article

Zusammenfassung

Lymphozytenkulturen werden nach Zugabe von Glyzerin als Gefrierschutzsubstanz zunächst gemeinsam mit ungefähr 1 °C/min Abkühlgeschwindigkeit bis zum vollständigen Erstarren eingefroren und dann mit verschiedener Geschwindigkeit (∼ 200 °C pro min und 3 bis 5 °C/min) auf verschieden tiefe Temperaturen (−22, −80 und −196 °C) gebracht. Alle eingefrorenen Proben weisen nach 24 h Kulturdauer eine kleinere, nach 48 h Kulturdauer eine wesentlich höhere Mitoserate als die Kontrollgruppe (unbehandelte, nicht eingefrorene Plasmaproben) auf. In den schnell auf −196 °C abgekühlten Proben wurden in beiden Fällen (24 h und 48 h Kulturdauer) keine Metaphaseplatten gefunden. Die Zellkonzentrationen waren nur bei den schnell auf −196 °C abgekühlten Kulturen stark verringert. Die Chromosomenaberrationsrate der eingefrorenen Kulturen ist nicht signifikant erhöht.

Preliminary results of investigations of lymphocytes, frozen and irradiated at low temperatures

I. The effects of cooling rate, low temperature, and incubation time on frozen lymphocytes

Summary

Peripheral human lymphocytes were cooled to the temperature of solidification at a rate of less than 1 °C/min using glycerol as a protective agent against the effects of freezing. After solidification at temperatures of −10 to −15 °C and cooling to about −22 °C one group of the samples was thawn and the others were cooled rapidly to −80 or −196 °C by immersion into solid carbon dioxide or liquid nitrogen. Other samples of the frozen cell suspension were cooled down to the same temperatures much slower at a cooling rate of 3 to 5 °C/min. After rapid thawing in a 25 °C water bath the cell suspensions were removed from glycerol and cultured for 24 or 48 h before stopping mitoses by adding colchicine. The samples frozen at −22 °C, the samples cooled both rapidly and slowly to −79 °C, and the ones cooled slowly to −196 °C showed a lower rate of mitosis when colchicine was added after 24 h and a significantly higher rate of mitosis after 48 h of incubation before adding colchicine as compared to the controls (untreated, unfrozen plasma). In the culture frozen rapidly to −196 °C no metaphases could be found. The cell concentrations before and after freezing showed no significant differences except those of the culture frozen rapidly to −196 °C. The chromosome aberration rate is not significantly increased.

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Copyright information

© Springer-Verlag 1971

Authors and Affiliations

  • R. E. Grillmaier
    • 1
  1. 1.Institut für Biophysik der Universität des Saarlandes-Boris Rajewsky-InstitutHomburg (Saar)

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