Extranukleare Desoxyribonukleinsäure in aerob und anaerob gezüchteter normaler Bäckerhefe sowie in der atmungsdefizienten „petite”-Mutante

Zusammenfassung

Pankreas-DNAase^** greift bei niedriger Temperatur die in Hefemitochondrien vorhandeneDNA nicht merkbar an, während verunreinigende nicht-mitochondrialeDNA zu säurelöslichen Bruchstücken abgebaut wird. Eine darauf beruhende Methode eignet sich zur selektiven Bestimmung mitochondrialerDNA in Mitochondrienfraktionen, die durch differentielles Zentrifugieren von Hefehomogenaten gewonnen worden und noch mit Zellkernmaterial verunreinigt sind.

In den nicht atmungsfähigen Mitochondrien der „petite”-Mutante der Bäckerhefe istDNA in einer gegenüber dem Wildtyp nicht wesentlich verringerten Menge vorhanden; die extrachromosomale Mutation zum „petite”-Typ ist demnach nicht mit einem völligen Verlust mitochondrialerDNA zu erklären. Auch die in Homogenaten anaerob gezüchteter Zellen des Wild-typs aufgefundenen mitochondrien-ähnlichen Partikeln enthalten eine geringe MengeDNA.

Abstract

PancreaticDNAase at low temperature fails to attack intramitochondrialDNA, whereas contaminating non-mitochondrialDNA is readily degraded to acid-soluble fragments. This makes possible a selective determination of mitochondrialDNA in crude particle fractions which have been obtained from yeast cell homogenates by differential centrifugation and are still contaminated by nuclear material.

The non-respiring mitochondria of the „petite” mutant of baker's yeast have been found to contain amounts ofDNA similar to those present in wild type yeast mitochondria. This finding indicates that the extrachromosomal mutation which gives rise to respiration-deficient „petite” cells is not due to a complete loss of mitochondrialDNA. The mitochondria-like particles occurring in homogenates of wild type yeast grown under anaerobic conditions have also been found to contain small amounts ofDNA.