Hippurathydrolase, ein neues Enzym aus Mikroorganismen, 1. Mitt.: Induzierte Biosynthese in Fusarium semitectum, Darstellung einer gereinigten Enzympräparation und Untersuchungen zur Substratspezifität

Zusammenfassung

• 1. InFusarium semitectum wird durch Kultivierung in Nährmedien mit Zusatz von Hippurat die Biosynthese eines Enzyms induziert, das bevorzugt die hydrolytische Spaltung von Hippursäure in Benzoesäure und Glycin bewirkt.

• 2. Es wurden die optimalen Kultivierungsbedingungen zur Gewinnung enzymreichen Mycelmaterials studiert.

• 3. Durch Hitzedenaturierung inaktiver Begleitstoffe bei 50° C, fraktionierte Fällung mit Ammoniumsulfat und selektive Adsorption an Calciumphosphatgel wird eine 130fach angereicherte Enzympräparation erhalten.

• 4. Auf Grund vergleichender Studien über die Substratspezifität gegenüber N-Benzoylaminosäuren, N-Acetylaminosäuren und verschiedenen Peptiden wird gezeigt, daß es sich hier um ein neues Enzym handelt, das im Gegensatz zu der ursprünglich als “Hippuricase” bezeichneten Aminoacylase (E.C. Nr. 3.5.1.14) aus tierischen Geweben spezifisch auf die Hydrolyse von Hippursäure und ähnlich aufgebauten N-Benzoylaminosäuren eingestellt ist.

• 5. Für das Enzym wird der Trivialname Hippurathydrolase und die systematische Bezeichnung N-Benzoylaminosäure-amidohydrolase vorgeschlagen.

Abstract

WhenFusarium semitectum is grown in media containing hippurate, the synthesis of an enzyme is induced, which effects hydrolytic splitting of hippuric acid to benzoic acid and glycine. A 130-fold purified enzyme preparation is obtained from mycelial extracts by heat treatment, ammonium sulfate fractionation, and adsorption on calcium phosphate gel. Comparative studies of the substrate specificity indicate the presence of a new enzyme. Contrary to aminoacylase (E.C. 3.5.1.14) and related enzymes, the preferred substrates of the new enzyme are hippuric acid and similar N-benzoylated amino acids. The trivial namehippurate hydrolase and the systematic nameN-benzoylaminoacid amidohydrolase is proposed for this enzyme.