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A direct enzymatic lactose assay using cellobiose-(lactose-)dehydrogenase from sporotrichum thermophile

  • Giorgio Canevascini
  • Krystyna Etienne
  • Hans Meier
Original Works

Summary

Advantage was taken of the high specificity of the cellobiose dehydrogenase (EC 1.1. 99), produced by the fungusSporotrichum (Chrysosporium) thermophile during growth on cellulose, for cellobiose and lactose to devise a direct enzymatic procedure for the determination of lactose in milk and milk products. The assay is based on the colorimetric measurement of the reduction of dichlorophenol indophenol concomitant with the oxidation of lactose to lactobionic acid.

The new procedure was shown to be as accurate as the classical lactose assay based onβ-galactosidase hydrolysis followed by a specific enzymatic test for galactose or glucose. It is simple and fast and relatively specific, being unaffected by the simultaneous presence of excess of sucrose or fructose. Nevertheless, a marked interference was observed with glucose and particularly maltose at high glucose/lactose or maltose/lactose ratios.

Keywords

Lactose Cellobiose Dichlorophenol Lactobionic Acid Cellobiose Dehydrogenase 
These keywords were added by machine and not by the authors. This process is experimental and the keywords may be updated as the learning algorithm improves.

Eine direkte enzymatische Lactosebestimmung mit Cellobiose-(Lactose-)dehydrogenase aus Sporotrichum thermophile

Zusammenfassung

Der PilzSporotrichum (Chrysosporium) thermophile sezerniert während seines Wachstums in einer cellulosehaltigen Nährlösung Cellobiosedehydrogenase (EC 1.1.99). Dieses Enzym hat eine hohe Spezifität für Cellobiose, Cellooligosaccharide und Lactose und oxidiert diese zu den entsprechenden Aldolactonen resp. Aldonsäuren sofern ein entsprechender Elektronenacceptor vorhanden ist. Es wurde eine colorimetrische Methode ausgearbeitet, um mit Hilfe des erwähnten Enzyms und mit Dichlorophenolindophenol als Elektronenreceptor Lactose in Milch und Milchprodukten zu bestimmen.

Die beschriebene Methode ist ebenso genau wie jene der Lactosebestimmung, die auf der Hydrolyse des Disaccharids mitβ-Galaktosidase und nachfolgender enzymatischer Bestimmung der Galaktose oder der Glucose beruht. Sie ist jedoch einfacher und bedeutend weniger zeitaufwendig. Gleichzeitige Anwesenheit von größeren Mengen Saccharose und/oder Fructose in der lactosehaltigen Probe stört nicht. Hingegen verfälscht ein hoher Überschuß an Glucose und besonders an Maltose die erhaltenen Lactosewerte.

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Copyright information

© J. F. Bergmann Verlag 1982

Authors and Affiliations

  • Giorgio Canevascini
    • 1
  • Krystyna Etienne
    • 1
  • Hans Meier
    • 1
  1. 1.Institut de Biologie végétale et de PhytochimieUniversity of FribourgCH-1700 FribourgSwitzerland

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