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Lipoamiddehydrogenase, Citratsynthase undβ-Hydroxyacyl-CoA-dehydrogenase des Skelettmuskels II. Kompartimentierung der Enzyme im Muskel-Mitochondrion und Ermittlung ihrer relativen Bindungsfestigkeit

Lipoamide dehydrogenase, citrate synthase, andβ-hydroxyacyl-coenzyme A-dehydrogenase of skeletal muscle. II. Compartimentation of the enzymes in the muscle mitochondrion and evaluation of the relative strength of binding

Summary

The compartimentation and the relative strength of binding of the enzymes lipoamide dehydrogenase (LIPDH), citrate synthase (CS), andβ-hydroxyacyl-coenzyme A-dehydrogenase (HADH) in mitochondria isolated from bovine muscle (M. sternomandibularis) were studied using the following methods: Availability of the enzymes for proteases before and after opening of the intracrystal line space and after disintegration of the mitochondrial membranes; release of the enzymes after different treatments of the mitochondria: homogenization with phosphate buffer plus Triton X-100; suspension in dest. water and saccharose-tris buffer with and without added digitonin; ultrasonic treatment; freezing and thawing. From the results it can be concluded that the three enzymes are bound to the inner surface of the inner membrane of the mitochondrion, and that the binding strength increases according to the series CS < HADH < LIPDH.

Zusammenfassung

Die Kompartimentierung und relative Bindungsfestigkeit der Enzyme Lipoamiddehydrogenase (LIPDH), Citratsynthase (CS) undβ-Hydroxyacyl-CoA-dehydrogenase (HADH) in Mitochondrien, die aus Rinderskelettmuskel (M. sternomandibularis) isoliert waren, wurden mit verschiedenen Methoden ermittelt: Zugänglichkeit der Enzyme für Proteasen vor und nach Öffnen des intracristalen Raumes sowie nach Desintegration der Mitochondrien-Membranen, Freisetzung der Enzyme durch folgende Behandlungen der Mitochondrien: Homogenisieren mit Phosphatpuffer plus Triton X-100, Suspendieren in dest. Wasser und in Saccharose-Trispuffer vor und nach Zusatz von Digitonin; Ultraschall-Behandlung, Gefrieren und Auftauen. Aus den Resultaten geht hervor, daß alle drei Enzyme an die Innenseite der inneren Membran des Mitochondrions gebunden sind und daß die Bindungsfestigkeit entsprechend der Reihenfolge CS < HADH < LIPDH zunimmt.

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Diese Arbeit ist Teil einer Dissertation von P. Gottesmann (Technische Universität München, 1982); sie wurde durch Mittel des Bundesministeriums für Jugend, Familie und Gesundheit unterstützt

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Gottesmann, P., Hamm, R. Lipoamiddehydrogenase, Citratsynthase undβ-Hydroxyacyl-CoA-dehydrogenase des Skelettmuskels II. Kompartimentierung der Enzyme im Muskel-Mitochondrion und Ermittlung ihrer relativen Bindungsfestigkeit. Z Lebensm Unters Forch 178, 371–375 (1984). https://doi.org/10.1007/BF01042230

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