Über die Auftrennung von Ferritin

Zusammenfassung

Die Anwendung verschiedener Fraktionierverfahren zeigt, daß die bei der Gelelektrophorese in Polyacrylamid gefundenen Ferritin-Komponenten sich auch bezüglich der Löslichkeit, der chromatographischen Eigenschaften und des Verhaltens bei der Gelfiltration auf Sephadex G-200 unterscheiden. Das Ferritin wurde mit Ferrocyanid oder — nach Austausch mit⁵⁹Fe — durch die Aktivität identifiziert. Bei der Extraktion eines Niederschlages von Ferritin mit Ammoniumsulfatlösungen fallender Molarität war das α-Ferritin über den ganzen Extraktionsbereich verteilt. Die β-, γ- und δ-Ferritine wurden in zunehmender Menge mit Lösungen fallender Molarität extrahiert.

Es wurden Unterschiede in der Extraktion von Ferritin verschiedenen Ursprungs (Pferd, Rind, Mensch) festgestellt. Bei der Chromatographie von Ferritin auf DEAE-Cellulose wurden mehrere Peaks erhalten. Bei der Papierelektrophorese wanderte das Ferritin verschiedener chromatographischer Peaks mit identischer Beweglichkeit, während sich bei der Gelelektrophorese deutliche Unterschiede in der Verteilung der Ferritin-Komponenten dieser Peaks zeigten. Eine partielle Trennung der Ferritin-Komponenten konnte auch bei der Gelfiltration erreicht werden. Der aufsteigende Teil des einzigen Peaks enthielt die elektrophoretisch langsameren β-, γ- und δ-Ferritine, im absteigenden Teil des Peaks war das α-Ferritin lokalisiert. Dieses Ergebnis weist auf Unterschiede in der Molekülgröße der Komponenten hin.

Abstract

The application of differtent fractionation procedures has shown that ferritin components separated by gel electrophoresis in polyacrylamide differ in respect to solubility and to behaviour in chromatography and gel filtration on Sephadex G-200. The ferritin has been identified with ferrocyanid or—after exchange with⁵⁹Fe—by its radiation. On extraction of a ferritin precipitate with solutions of ammonium sulphate of decreasing molarity α-ferritin was distributed over the whole extraction range. The slower β-, γ- und δ-ferritins appeared in increasing amounts in solutions of decreasing molarities. Differences were observed in the extraction of ferritins of different origin (horse, beef, human). Chromatography of ferritin on DEAE cellulose gave several peaks. In paper electrophoresis, the mobility of the chromatographically different ferritins was the same. In gel electrophoresis, however, differences in the distribution of the ferritin components of these peaks were found. A partial separation of the different ferritin components was also obtained in gel filtration. The leading part of the only peak contained the β-, γ- and δ-components, while α-ferritin was found in the trailing part. This result may be ascribed to differences in the molecular sizes of the components.