Histologische Prüfung der metachromogenen Wirksamkeit verschiedener Toluidinblau- und Azur A-Präparate

Zusammenfassung

Die vergleichende Untersuchung von sieben Toluidinblau- und Azur A-Präparaten hat zu folgenden Ergebnissen geführt:

• 1. Die spezifischen Extinktionen der wäßrigen Lösungen als Maß des wirksamen Farbstoffgehalts variieren zwischen 60,2 und 153,0. Damit enthält ein Teil der Präparate beträchtliche Mengen farbloser Verunreinigungen.

• 2. Die Wasserstoffionenkonzentrationen der 1%igen wäßrigen Lösungen variieren zwischen pH 3,06 und 6,62. Diese Differenzen erklären die Unterschiede zwischen den mit den einzelnen Farbstoffpräparaten im Gewebsschnitt zu erzielenden metachromatischen Effekten. Der pH-Einfluß auf die Metachromasie ist zweckmäßiger durch Farbstoffverdünnung als durch Pufferung auszuschalten. Bei Verdünnung ist aber zu berücksichtigen, daß die Präparate einen sehr unterschiedlichen Farbstoffgehalt haben.

• 3. Bei der Bestimmung der minimalen gegenüber sauren Gewebsbestandteilen noch metachromogenen Farbstoffkonzentration führen die einzelnen Präparate zu unterschiedlichen Ergebnissen. Die gefundenen Zahlenwerte schwanken für den Schleim der Colonbecherzellen zwischen 1:25000 und 1:150000.

• 4. Bei der Messung der Resistenz der Metachromasie gegenüber steigenden Alkoholkonzentrationen ergeben sich zwischen den einzelnen Farbstoffpräparaten ebenfalls bedeutende Unterschiede. Unter den geprüften Präparaten sind nur zwei, die Becherzellschleim in 30% Alkohol metachromatisch färbten, und nur eines, bei dem noch in 50% Alkohol Metachromasie zu erzielen ist.

Nach diesen Befunden erscheint es unbedingt notwendig, daß für qualitative und quantitative Untersuchungen mit Hilfe des histochemischen Metachromasietestes immer der gleiche standardisierte und kontrollierte Farbstoff verwendet wird. Auf Grund der mitgeteilten Ergebnisse wird für diesen Zweck das mit Zertifikat versehene Toluidinblau O der National Aniline Division als besonders geeignet vorgeschlagen.

Summary

The comparative study of seven specimens of Toluidine blue and Azure A respectively had the following results:

• 1. The specific extinctions of these solutions (in water) have values between 60,2 and 153,0. This means, that some of the specimens contain considerable amounts of non coloured contaminations.

• 2. The pH of the 1% dye solutions (in water) differs between 3,06 and 6,62. This considerable variability influences dye binding and metachromasia. The influence of pH may be compensated by dilution better than by tamponation.

• 3. Minimal dye concentrations with metachromogenic potency in respect to the mucus of colon goblet cells are between 1:25000 and 1:150000 in relation to the dye specimen employed.

• 4. The metachromasia of the dyes examined in this study is characterized by significant differences in the resistance against alcohol. In staining goblet cells no more than two specimens are resistant against 30% alcohol and only one against 50%.

For routine work in histochemistry therefore only one standardized and controlled dye should be used. From the authors' experience the certified Toluidine blue O (Nat. Anil. Div.) can be recommended.