Histochemical demonstration of carbohydrates by a convenient sulphation technique

  • P. R. Lewis
  • T. Adesanya
  • I. Grillo
Article

Summary

A simple and convenient procedure has been devised for the staining of carbohydrate derivatives in tissue sections. Dewaxed sections are sulphated either by immersion in a 1:1 acetic-sulphuric acid mixture for 10–15 minutes or by exposure to sulphuryl chloride vapour for 15–20 minutes. The slides are then stained in a 0.05% solution of methylene blue buffered to aph of 2.4. Highly selective staining of tissue carbohydrates is obtained. The acetic-sulphuric mixture rapidly hydrolyses glycogen which is therefore lost, but the sulphuryl chloride technique produces intense staining of glycogen. The various steps in the technique are discussed, with particular emphasis on the reasons for the final choice of conditions. These sulphation techniques have several advantages over the PAS procedure: the overall picture obtained is clearer; definition at high magnifications is often better; and the versatility of the technique can be widened by varying the precise conditions of sulphation and staining to suit the particular problem being studied.

Keywords

Methylene Blue Starke Intense Staining Final Choice Histochemical Demonstration 

Zusammenfassung

Es wird eine einfache und handliche Methode zur Darstellung von Kohlenhydratderivaten in Gewebsschnitten beschrieben. Entparaffinierte Schnitte werden 10–15 min in einem 1:1 Essigsäure-Schwefelsäure-Gemisch bzw. durch Behandlung mit Sulfurylchloriddampf während 15–20 min sulfatiert und anschließend mit einer 0,5%igen Methylenblaulösung (gepuffert aufph 2,4) gefärbt. Man erhält eine stark selektive Färbung der Gewebskohlenhydrate. Das Essigsäure-Schwefelsäure-Gemisch hydrolysiert und entfernt das Glykogen sehr rasch. Demgegenüber ist nach Sulfurylchloridbehandlung eine starke Anfärbung von Glykogen möglich. Die einzelnen Schritte der Technik werden diskutiert, besonders die Gründe, die uns bei der endgültigen Wahl der Methodik geleitet haben. Die Methode bietet verschiedene Vorteile gegenüber der PAS-Reaktion: Das Übersichtsbild ist klarer, die Schärfe ist bei starken Vergrößerungen oft besser; die Plastizität der Methode ermöglicht es, Sulfatierung und Färbung den Bedürfnissen verschiedener Probleme anzupassen.

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References

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Copyright information

© Springer-Verlag 1959

Authors and Affiliations

  • P. R. Lewis
    • 1
  • T. Adesanya
    • 1
  • I. Grillo
    • 1
  1. 1.From the Department of AnatomyUniversity of CambridgeEngland

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