Untersuchungen zur chemischen Struktur von α-Kristallin

Zusammenfassung

• 1. Aus Rinderlinsen dargestelltes α-Kristallin wurde papierelektrophoretisch und durch Bestimmung der N-terminalen Aminosäuren auf seine Einheitlichkeit geprüft. Es konnten keine Anhaltspunkte für das Vorliegen von Beimengungen anderer Proteine im α-Kristallin gefunden werden.

• 2. Die Bestimmung der elektrophoretischen Beweglichkeit des α-Kristallins nachWael ergab einen Mittelwert von 3,8×10⁻⁵ cm² V⁻¹ sec⁻¹ (Veronalpuffer p_H 8,6).

• 3. Glutaminsäure liegt im α-Kristallin N-terminal vor. Bei der Bestimmung der N-terminalen Aminosäuren ließen sich daneben auch sehr geringe Mengen DNP-Serin, DNP-Glycin, DNP-Threonin, DNP-Alanin und DNP-Leucin nachweisen, die aber vermutlich auf Fehlreaktionen zurückzuführen sind.

• 4. Von 17 qualitativ nachgewiesenen Aminosäuren des α-Kristallins wurden 16 quantitativ nachStein undMoore bestimmt. Von der eingesetzten Menge α-Kristallin konnten auf diese Weise 95–98% bestimmten Aminosäuren zugeordnet werden. Die Ergebnisse der quantitativen Aminosäurebestimmung werden mit den bisher bekannten Analysedaten verglichen und die Fehlermöglichkeiten diskutiert.

• 5. Bei enzymatischer Partialhydrolyse des α-Kristallins mit Pepsin, Trypsin oder Chymotrypsin erhält man Reaktionsgemische, die sich papierelektrophoretisch in einzelne Fraktionen unterschiedlicher Beweglichkeit trennen lassen.