Summary
Proteins in homogenates of yolk-rich cricket eggs were fractionated by sonication, differential centrifugation, acetic acid-extraction and column chromatography on hydroxyapatite and separated by SDS-polyacrylamide electrophoresis in 8 M urea. Radioactivity was introduced by incubating the eggs, which are impermeable to labeled amino acids, in a14CO2-atmosphere.14C-label in protein extracts was resistant to hot TCA-extraction and was proved to be mainly in glutamic acid and aspartic acid. The profiles of radioactivity across the electropherogram as analysed by gel-fractionation and scintillation counting or by radioautography were found to be distinct from the pattern of stained protein-bands. During early development characteristic changes in the patterns of radioactive proteins occurred at the three stages tested: cleavage (omnipotency), germ-disc (determination) and germ-band (primary differentiation).
Zusammenfassung
Aus Grilleneiern wurden verschiedene Proteingemische gewonnen durch: Homogenisierung, Ultrabeschallung, fraktionierte Zentrifugation, Essigsäureextraktion und Säulenchromatographie an Hydroxyapatit. Die nach Acetonfällung in 8 M Harnstoff gelösten Proteine wurden durch SDS-Polyacrylamidelektrophorese aufgetrennt und densitometrisch analysiert. In Grilleneiern ließen sich durch Inkubation in14CO2 Proteine radioaktiv markieren. Die Markierungsrate einzelner Proteinfraktionen wurde als Radioaktivität eluierter Gelfraktionen oder im Autoradiogramm von Gelscheiben gemessen. Die Verteilung der radioaktiv markierten Proteine im Elektropherogramm entsprach nicht dem Muster der gefärbten Proteinbanden und unterschied sich in charakteristischer Weise in den geprüften Stadien: Furchung (Omnipotenz), Keimanlage (Determination) und Keimstreif (Primäre Differenzierung).
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Wir danken der Deutschen Forschungsgemeinschaft für die Unterstützung dieser Arbeit durch ein Ausbildungsstipendium (G. W.) und Sachbeihilfen.
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Wegener, G., Kläner, S. & Sauer, H.W. Proteine in der Frühentwicklung der Grille (Acheta domesticus, Orthoptera). W. Roux' Archiv f. Entwicklungsmechanik 167, 118–136 (1971). https://doi.org/10.1007/BF00577036
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DOI: https://doi.org/10.1007/BF00577036