Immunhistochemische Untersuchungen mittles eines Enzym-Immunglobulin-Konjugates

Summary

An anti-human globulin-peroxidase conjugate was prepared according to the procedure of Avrameas using glutaraldehyde as coupling agent. The conjugate was employed to demonstrate immunoglobulins in the skin of patients with SLE, CDLE, pemphigus vulgaris, pemphigus erythematosus and bullous pemphigoid. Cryostat sections were treated with the conjugate and the localization of the immunoglobulin-conjugate complexes was visualized by incubating the sections in Graham and Karnovsky's medium for the demonstration of the marker enzyme. The distribution of the reaction product observed in the different specimens was identical with the specific immunofluorescent patterns described in these diseases. Appropriate controls confirmed the specificity of the results. Thus, enzyme labelled anti-human immunoglobulins are suitabel for the detection of immunoglobulins deposited in the skin and, moreover, offer the following advantages: 1. They do not require an expensive fluorescent microscope equipment. 2. The preparations are relatively stable, 3. The conjugates offer the possibility to study the localization of immunoglobulins at the ultrastructural level.

Zusammenfassung

Nach dem Verfahren von Avrameas wurde ein Antihuman-globulin-Peroxidase-Konjugat mittels Gluteraldehyd als Kopplungssubstanz hergestellt und zum Nachweis von Immunglobulinen in der Haut von Patienten mit systemischem und chronisch discoidem Lupus erythematosus, Pemphigus vulgaris und Pemphigus erythematosus sowie bullösem Pemphigoid verwendet. Kryostatschnitte wurden nach Behandlung mit dem Konjugat zum Nachweis des “Marker”-enzyms im cytochemischen Medium von Graham und Karnovsky inkubiert, wodurch die Lokalisation der Immunglobulinkonjugat-Komplexe innerhalb des Gewebes sichtbar gemacht werden konnte. Die beobachtete Lokalisation und Verteilung des Reaktionsproduktes war mit den spezifischen, für diese Dermatose beschriebenen Immunfluorescenzmuster identisch. Entsprechende Kontrollen bestätigen die Spezifität der Ergebnisse.

Mit Enzymen markierte antihuman-Globuline könne daher zum Nachweis in der Haut abgelagerter Immunglobuline herangezogen werden. Darüber hinaus bieten sie folgende Vorteile: 1. Kostspielige fluorescenzmikroskopische Einrichtungen werden nicht benötigt. 2. Die Präparate sind relativ lange haltbar. 3. Derartige Konjugate eröffnen die Möglichkeit, die Lokalisation von Immunglobulin auch auf ultrastruktureller Ebene zu untersuchen.