Spezielle analytische Methoden für die Biochemie und physiologische Chemie

Zusammenfassung

Es wird eine neue Methode zur spezifischen Bestimmung von freiem α-Naphthol in Gegenwart eines großen Überschusses von α-Naphthylesteremulsion beschrieben. Alle notwendigen reaktionskinetischen und optischen Bedingungen werden untersucht. Die Methode eignet sich besonders gut zur enzymatischen Analyse von Fermenten, die α-Naphthylester hydrolysieren. Nach genauer Beschreibung von Arbeitsvorschriften werden folgende Anwendungsbeispiele ausgeführt: a) die Bestimmung von freiem α-Naphthol in rohen α-Naphthylesterpräparaten, b) die Bestimmung von Enzymaktivitäten: Substratvariation im menschlichen Serum, c) Verwendung als „Suchreaktion“: Ortung der α-Naphthylpropionat spaltenden Fermente und Proteine des menschlichen Serums durch biologische Analyse der Eluate nach präparativer Stärkebreielektrophorese. Die Empfindlichkeit der Methode beträgt mindestens 0,1 μMol α-Naphthol; die Störanfälligkeit ist minimal.

Summary

A new method is described for the specific determination of free α-naphthol in presence of a large excess of emulsions of α-naphthol esters. The kinetics of the reaction and all optical conditions are tested. The method is applicable to the determination of esterases which hydrolyse α-naphthol esters. The following examples for the use of the method are described: a) determination of free α-naphthol in industrial α-naphthol ester preparations, b) determination of esterase activities; c) application as “finding test”: localisation of the α-naphthol propionic acid ester hydrolysing esterases and proteins of human serum by biological analysis of the eluates after preparative starch electrophoresis. The sensitivity is at least 0.1 μMol of α-naphthol; the security is optimal.