Immobilized xanthine oxidase in the flow determination of guanase

Zusammenfassung

Xanthinoxidase wurde durch Adsorption an SiO₂- oder TiO₂-Perlen und kontrollierter Porengröße in Glassäulen immobilisiert. Diese Säulen wurden in ein Durchflußsystem eingeschaltet, in dem das durch Wirkung der zu bestimmenden Guanase aus Guamin gebildete Xanthin mit Hilfe der Xanthinoxidase oxidiert wurde. Das dabei entstehende H₂O₂ wurde über die Reaktion mit Jod elektrochemisch gemessen. Für eine Analyse werden 15 min benötigt. Die durchschnittliche relative Standardabweichung beträgt ±7%. Die Endbestimmung kann auch spektralphotometrisch erfolgen.

Summary

Xanthine oxidase was immobilized by adsorption on control pore SiO₂ or TiO₂ beads in glass tube columns. These enzyme columns were incorporated into a flow system and used to measure xanthine by electrochemical monitoring of oxygen consumed in the oxidation of the xanthine. Guanase standards were then injected into aqueous guanine, the xanthine product of the deamination of guanine allowed to flow through the enzyme column, and the hydrogen peroxide product measured electrochemically via a coupling reaction using iodide. The analysis time per sample was 15 min, the average relative standard deviation ±7%. The measurement can alternatively be performed by spectrophotometry.