Ultrahistochemische Darstellung der Glykokalyx an Zellen der Meerschweinchen-Cochlea durch Rutheniumrot-Kontrastierung

Summary

Here we report of the ultrahistochemical representation of the cell coat at the supporting and the neurosensory cells of the guinea-pigs cochlea by means of the Rutheniumred-contrastation. This Rutheniumred-contrastation was performed as well by the original method, found out by Luft (1964) as by the modification of it, described 1968 by Monis and Zambrano. Partly the in vivo perfusion of the cochlea's perilymph spaces with the incubation medium was accomplished by the round window, partly there were brought into the Rutheniumred medium before fabricated preparations of pellicles. In the in vivo perfusion of the perilymph spaces a fine granular of fine lamellar precipitation of the Rutheniumred was to be seen at the apical plasmalemm of these room's epithel lining, at the tympanal lining-cell's surface, at the extracellular ground substance of the basilar membran and at the cell surfaces of the Reissner membran, turned to the scala vestibuli. At pellicle preparations, in addition, the apical plasmalemm of the supporting and neurosensory cells of the Corti organ, inclusive of the sterocilien and the microvilli als also the tectoria membran were surrounded by a Rutheniumred seam. In the interepithelial spaces of the Corti organ there could no Rutheniumred binding be proved. The zonulae occludentes formed permeability-barriers and were not contrasted. A second substrate-bound barrier probably builds up the Rutheniumred of itself. Between the two tryed methods for Rutheniumred-contrasting, in our examinations the Luft-method proved to be more favourable with respect to the penetration's degree and the intensity of the precipitate.

Zusammenfassung

Es wird über die ultrahistochemische Darstellung der Glykocalyx (Cell coat) an den Stütz- und Sinneszellen der Meerschweinchen-Cochlea mittels Rutheniumrot-Kontrastierung berichtet. Die Rutheniumrot-Kontrastierung erfolgte nach der von Luft (1964) erarbeiteten Originalmethode sowie nach der von Monis u. Zambrano (1968) beschriebenen Modifikation. Mit dem Inkubationsmedium wurde z. T. die in vivo-Perfusion der Perilymphräume der Cochlea über das runde Fenster durchgeführt, z. T. wurden zuvor angefertigte Häutchenpräparate in das rutheniumrothaltige Medium gebracht. Bei der in vivo-Perfusion der Perilymphräume wurde eine feingranuläre oder feinlamellöse Rutheniumrot-Präcipitaion am apikalen Plasmalemm der Epithelauskleidung dieser Räume, an der Oberfläche der tympanalen Belegzellen, an der extracellulären Grundsubstanz der Basilarmembran sowie an den der Scala vestibuli zugewandten Zelloberflächen der Reissnerschen Membran beobachtet. An Häutchenpräparaten wurden zusätzlich das apikale Plasmalemm der Stütz- und Sinneszellen des Corti-Organs einschließlich der Stereocilien und der Mikrovilli sowie die Membrana tectoria von einem rutheniumrotpositiven Saum umgeben. In den interepithelialen Räumen des Corti-Organs konnte keine Rutheniumrot-Bindung nachgewiesen werden. Die Zonulae occludentes bildeten Permeabilitätsbarrieren und wurden nicht kontrastiert. Eine zweite, substratgebundene Barriere baut das Rutheniumrot wahrscheinlich selbst auf. Von den beiden erprobten Methoden zur Rutheniumrot-Kontrastierung erwies sich bei unseren Untersuchungen die Luftsche Methode bezüglich des Penetrationsgrades und der Intensität des Präcipitates als günstiger.