Skip to main content
SpringerLink
Log in

Über eine extraktions-chromatographische Trennung der freien Porphyrine und deren simultane quantitative Bestimmung

Extraction-chromatographic separation of free porphyrins and their simultaneous quantitative determination

  • Published:
Fresenius' Zeitschrift für analytische Chemie Aims and scope Submit manuscript

Abstract

The method described allows the decomposition of porphyrin mixtures by extraction chromatography in the partition system tri-n-butylphosphate/hydrochloric acid. Separation and quantitation of coproporphyrin and uroporphyrin are performed simultaneously within 1–2 hrs. The influence of the acid concentration cHCl and column temperature Ts on sensitivity and resolution are studied thoroughly. Under suitable conditions, both porphyrins can be determined up to 0.2 μg with an accuracy of 8–10% (95% deviation); the limit of detectability under the conditions used is of the order of 0.05μg. Furthermore the method proved to be an excellent tool to decompose very complex porphyrin mixtures which can be occasionally isolated from the urine of pathological cases.

Zusammenfassung

Zur Analyse von komplexen Porphyringemischen wird ein extraktions-chromatographisches Verfahren beschrieben, das über eine Säulentrennung im Verteilungssystem TBP/HCl eine Auftrennung und quantitative Bestimmung der einzelnen Porphyrine in einem Arbeitsgang durchzuführen gestattet. Am Beispiel Coproporphyrin/Uroporphyrin wird der Einfluß von Säurekonzentration cHCl und Säulentemperatur Ts auf Retentionsvolumina und Auflösung eingehend untersucht.

Eine Trennung der beiden Porphyrine mit simultaner quantitativer Bestimmung kann in ca. 1–2 h durchgeführt werden. Eine Isolierung aus Urin über eine Extraktion an TBP-Filterböden mit anschließender Säulentrennung und Bestimmung nimmt ca. 2–3 h in Anspruch. Hierbei können noch Porphyrinmengen von ca. 0,05 μg erfaßt und solche von 0,2 μg mit einer Genauigkeit von ca. 8–10% (doppelter mittlerer Fehler des Einzelwertes) bestimmt werden.

Die beschriebene Methode gestattet darüber hinaus die Auftrennung sehr komplexer Porphyringemische, wie sie bisweilen aus dem Urin von porphyrieerkrankten Patienten isoliert werden [31,32,34].

This is a preview of subscription content, log in via an institution to check access.

Access this article

Log in via an institution

Price excludes VAT (USA)
Tax calculation will be finalised during checkout.

Instant access to the full article PDF.

Institutional subscriptions

Similar content being viewed by others

Literatur

  1. Blumer, M.: Anal Chem. 28, 1640 (1956); vgl. diese Z. 157, 135 (1957).

    Article  CAS  Google Scholar 

  2. Brugsch, J., u. F. Kubowitz: Biochem. Z. 324, 244 (1953).

    CAS  PubMed  Google Scholar 

  3. Chu, T. C., and E. J.-H. Chu: J. Biol. Chem. 227, 505 (1957). vgl. diese Z. 165, 399 (1959).

    CAS  PubMed  Google Scholar 

  4. — —: J. Chromatog. 21, 46 (1966); vgl. diese Z. 228, 453 (1967).

    Article  CAS  Google Scholar 

  5. —, A. A. Green, and E. J.-H. Chu: J. Biol. Chem. 190, 643 (1951).

    CAS  PubMed  Google Scholar 

  6. Clotten, R., u. H. Wehinger: Deut. Med. Wochschr. 87, 131 (1962).

    Article  CAS  Google Scholar 

  7. Comfort, A.: Biochem. J. 44, 111 (1949).

    Article  CAS  Google Scholar 

  8. Cornford, P. A. D., and A. Benson: J. Chromatog. 10, 141 (1963); vgl. diese Z. 201, 63 (1964).

    Article  CAS  Google Scholar 

  9. Del C., Battle, A. M., and A. Benson: J. Chromatog. 25, 117 (1966).

    Article  Google Scholar 

  10. Dresel, E. I. B., and J. E. Falk: Biochem. J. 63, 72 (1956).

    Article  CAS  Google Scholar 

  11. Ellfolk, N., and G. Sievers: J. Chromatog. 25, 373 (1966).

    Article  CAS  Google Scholar 

  12. Eriksen, L.: Scand. J. Clin. Lab. Invest. 5, 155 (1953).

    Article  CAS  Google Scholar 

  13. —: Scand. J. Clin. Lab. Invest. 9, 97 (1957).

    Article  CAS  Google Scholar 

  14. —: Scand. J. Clin. Lab. Invest. 10, 319 (1958).

    Article  CAS  Google Scholar 

  15. Eschrich, H.: diese Z. 226, 100 (1967).

    CAS  Google Scholar 

  16. Falk, J. E.: J. Chromatog. 5, 277 (1961).

    Article  CAS  Google Scholar 

  17. —, and A. Benson: Biochem. J. 55, 101 (1953).

    Article  CAS  Google Scholar 

  18. —, E. I. B. Dresel, A. Benson, and B. C. Knight: Biochem. J. 63, 87 (1956).

    Article  CAS  Google Scholar 

  19. Fischer, H.: Z. Physiol. Chem. 96, 177 (1915).

    Google Scholar 

  20. —, u. H. Hofmann: Z. Physiol. Chem. 246, 15 (1937).

    Article  CAS  Google Scholar 

  21. —, u. H. Orth: Chemie des Pyrrols, Bd. II/1. Hälfte. Leipzig: Akad. Verlagsges. 1937.

    Google Scholar 

  22. Granick, S., and L. Bogorad: J. Biol. Chem. 202, 781 (1953).

    CAS  PubMed  Google Scholar 

  23. Heilmeyer, L.: Die Störungen der Hämsynthese. Stuttgart: G. Thieme 1964.

    Google Scholar 

  24. Henderson, R. W., and T. C. Morton: J. Chromatog. 25, 180 (1967).

    Article  Google Scholar 

  25. Jensen, J.: J. Chromatog. 10, 236 (1963); vgl. diese Z. 204, 320 (1964).

    Article  CAS  Google Scholar 

  26. Kehl, R., u. W. Stich: Z. Physiol. Chem. 289, 6 (1951); vgl. diese Z. 137, 445 (1952/53).

    Article  CAS  Google Scholar 

  27. — —: Z. Physiol. Chem. 290, 151 (1952); vgl. diese Z. 142, 125 (1954).

    CAS  Google Scholar 

  28. Larsen, E. G., I. Melcer, and J. M. Orten: Federation Proc. 14, 440 (1955).

    Google Scholar 

  29. Lucas, J., and M. Orten: J. Biol. Chem. 191, 287 (1951).

    CAS  PubMed  Google Scholar 

  30. Mundschenk, H.: J. Chromatog. 25, 380 (1966).

    Article  CAS  Google Scholar 

  31. —: J. Chromatog. 37, 431 (1968).

    Article  CAS  Google Scholar 

  32. —: J. Chromatog. 38, 106 (1968).

    Article  CAS  Google Scholar 

  33. —: diese Z. 233, 25 (1968).

    Google Scholar 

  34. - In Vorbereitung.

  35. Nicholas, R. E. H.: Biochem. J. 48, 309 (1951); vgl. diese Z. 135, 128 (1952).

    Article  CAS  Google Scholar 

  36. —, and C. Rimington: Scand J. Clin. Lab. Invest. 1, 12 (1949).

    Article  CAS  Google Scholar 

  37. — —: Biochem. J. 48, 306 (1951).

    Article  CAS  Google Scholar 

  38. Schwartz, S., and H. M. Wikoff: J. Biol. Chem. 194, 563 (1952).

    CAS  PubMed  Google Scholar 

Download references

Author information

Authors and Affiliations

  1. I. Medizinische Klinik und Poliklinik der Johannes Gutenberg-Universität, Mainz, Germany

    H. Mundschenk

Authors
  1. H. Mundschenk
    View author publications

    You can also search for this author in PubMed Google Scholar

Rights and permissions

Reprints and permissions

About this article

Cite this article

Mundschenk, H. Über eine extraktions-chromatographische Trennung der freien Porphyrine und deren simultane quantitative Bestimmung. Z. Anal. Chem. 246, 161–169 (1969). https://doi.org/10.1007/BF00454708

Download citation

  • Received:

  • Accepted:

  • Published:

  • Issue Date:

  • DOI: https://doi.org/10.1007/BF00454708

Search

Navigation