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Quantitative Bestimmung von DNA in Geweben durch Thymin-Analyse

I. Gas-chromatographische Bestimmung

Quantitative determination of DNA in tissues by thymine analysis

I. Determination by gas-liquid chromatography

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Fresenius' Zeitschrift für analytische Chemie Aims and scope Submit manuscript

Abstract

A micro- determination of DNA in biological materials by gas-chromatographic analysis of thymine is reported. After decomposition of lyophilized tissues by heating with formic acid, drying, extraction of thymine with acetone/water 98∶2 (v/v), sublimation and thin-layer chromatography the thymine content is determined by gas-chromatography, yields being controlled by isotope dilution techniques. The smallest amount of tissue DNA quantitatively detectable by this method is 10 μg. The relative standard deviation is 13%. The gas-chromatographic results were monitored by UV-spectroscopy.

Zusammenfassung

Es wird über eine Mikrobestimmung von DNA in biologischem Material durch gas-chromatographische Thymin-Analyse berichtet. Nach Aufschluß der lyophilisierten Gewebe mit heißer Ameisensäure, Trocknen, Extraktion von Thymin mit Aceton/Wasser 98∶2 (v/v), Sublimation und Dünnschicht-Chromatographie wird der Thymingehalt gas-chromatographisch bestimmt. Die Ausbeuten werden durch Isotopenverdünnungsanalyse kontrolliert. Die kleinste, mit dieser Methode nachweisbare DNA-Menge in Geweben beträgt etwa 10 μg. Die relative Standardabweichung liegt bei 13%. Die gas-chromatographischen Ergebnisse ließen sich durch UV-Spektroskopie bestätigen.

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Authors and Affiliations

  1. Institut für Anorganische Chemie und Kernchemie und Physiologisch-Chemisches Institut der Universität Mainz, Deutschland

    F. D. Gauchel, Gisela Gauchel, K. Beyermann & R. K. Zahn

  2. Univ.-Kinderklinik, Düsseldorf 1, D-4000, Moorenstr. 5, Deutschland

    F. D. Gauchel

Authors
  1. F. D. Gauchel
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  2. Gisela Gauchel
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  3. K. Beyermann
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  4. R. K. Zahn
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Der Deutschen Forschungsgemeinschaft danken wir für die uns zur Verfügung gestellte gas-chromatographische Ausrüstung (Be 263/4).

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Gauchel, F.D., Gauchel, G., Beyermann, K. et al. Quantitative Bestimmung von DNA in Geweben durch Thymin-Analyse. Z. Anal. Chem. 259, 177–183 (1972). https://doi.org/10.1007/BF00428435

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