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Fresenius' Zeitschrift für analytische Chemie

, Volume 269, Issue 3, pp 193–199 | Cite as

Zur Aktivitätsbestimmung von Ribonuclease mit Ribonucleinsäure

  • G. Talsky
  • W. Müller
Originalabhandlungen
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Zusammenfassung

Der Einfluß von NaCl, KNO3, Na2SO4 und CaCl2 auf die Hydrolysengeschwindigkeit von RNA durch RNase wurde untersucht und die Auswertung der gekrümmten Zeit-Unisatz-Kurven, die man bei Anwendung der pH-stat und ΔpH-Methode erhält, diskutiert. Die in der Literatur beschriebene Erhöhung der Reaktionsgeschwindigkeit in Gegenwart von Salzen konnte nur bis etwa 9°C beobachtet werden, wenn man die Anfangsgeschwindigkeiten vergleicht. Oberhalb dieser Temperatur wirken Salze hemmend, wobei es zu einer Glättung der Zeit-Umsatz-Kurven kommt.

Die Methode, die Reaktionsgeschwindigkeit aus dem Umsatz zu ermitteln, den man nach längerer Inkubation von RNS mit RNase erhält, führt wegen der gekrümmten Kurve zu fehlerhaften Resultaten. Gute Ergebnisse erhält man jedoch mit der pH-stat-Methode, wenn man die Geschwindigkeit aus dem ersten 30 sec-Abschnitt ermittelt oder besser die Anfangsgeschwindigkeit nach der ΔpH-Methode bestimmt.

Aktivitätsbestimmung von Ribonuclease mit Ribonucleinsäure Salz- und Temperatureinfluß, pH-stat-Methode, ΔpH-Methode 

On the estimation of the activity of ribonuclease with ribonucleic acid

Abstract

The effects of NaCl, KNO3, Na2SO4 and CaCl2 on the rate of the hydrolysis of RNA by RNase were studied and the evaluation of bended time-turnover curves obtained with the pH-stat or ΔpH-method were discussed. The raised rate of reaction in presence of salts, cited in the literature, could only be observed until 9°C, if initial rates were compared. Above this temperature salts inhibit the reaction and the time-turnover curves will be linearised.

Estimation of the reaction rate from the turnover received after longer incubation of RNA with RNase, leads to wrong results because of the bended curves. Good results, however, can be obtained with the pH-stat method if finding out the rates of the first 30 sec period or better if the rates at the beginning of the reaction are estimated with the ΔpH-method.

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Copyright information

© Springer-Verlag 1974

Authors and Affiliations

  • G. Talsky
    • 1
  • W. Müller
    • 1
  1. 1.Institut für Technische Chemie der Technischen Hochschule MünchenBundesrepublik Deutschland

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