Diabetologia

, Volume 2, Issue 2, pp 110–116 | Cite as

Fine structure of B-Cell from pancreas pieces incubated in vitro

  • Josë Gomez-Acebo
  • Clemente Lopez-Quijada
  • José Luis R-Candela
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Summary

Pieces of the tail of the rabbit pancreas were incubated in a shaking incubator with Ringer solution supplemented with glucose (0.6 mg/ml), pyruvate, fumarate and glutamate (5 mM each), in a gas phase of 95% O2: 5% CO2 at 38 °C. There were no significant changes in the fine structure of the islet cells attributable to the incubation. Combined glutaraldehyde and osmium fixation of such incubated slices gave good preservation of the secretory products of the B-cells. The mechanisms of degranulation and regranulation of the B-cells were observed to be the same as those reported for the animal in vivo. The intensity of secretion differed depending upon whether the animals were killed after being knocked unsonscious or after being injected with a lethal dose of anaesthesia. B-cell secretion was more prominent in the former case. The method is considered to be valid for further studies on the mechanism of granule release and synthesis in the pancreas of rabbit.

Keywords

Osmium Islet Cell Fumarate Nous Avons Ringer Solution 

Structure fine, de la cellule bêta dans des tranches de pancréas incubées in vitro

Résumé

Nous avons utilisé des fragments de queue de pancréas de lapin incubés à 38 °C. dans un appareil de Dubnoff. Le milieu d'incubation composé de Ringer additionné de glucose (0.6 mg/ml), de pyruvate, de fumarate et de glutamate (5 mM) était ventilé avec un mélange O2-CO2 (95−5%) pendant toute la durée de l'incubation. — Nous n'avons remarqué aucun changement significatif de la structure fine des cellules des îlots de Langerhans attribuable au fait de l'incubation. La fixation combinée par glutaraldehyde et osmium a permis d'obtenir une bonne protection des produits de sécrétion des cellules bêta. Nous avons pu remarquer que les mécanismes de dégranulation et de regranulation des cellules bêta étaient les mêmes que ceux notés lors de l'étude in vivo. L'intensité de la sécrétion varie suivant que l'animal est décapité après avoir été assommé ou après l'injection d'une dose léthale de produit anesthésique. En effet la sécrétion des cellules bêta est plus grande dans le premier cas. — Nous considérons la méthode employée valable pour des études ultérieures sur la sécrétion du pancréas de lapin.

Feinstruktur der B-Zellen von Pankreasschnitten inkubiert in vitro

Zusammenfassung

In einem Schüttelbad wurden Schnitte vom Pankreasschwanz von Kaninchen bei 38 ° C mit Ringerpuffer inkubiert, der mit 0.6 mg/ml Glucose und 5 mM Pyruvat, Fumarat und Glutamat angereichert war. — An der Feinstruktur der Inselzellen ließen sich keine signifikanten, der Inkubation zuzuschreibenden Veränderungen nachweisen. Durch kombinierte Fixierung mit Glutaraldehyd und Osmium ließen sich die Sekretionsprodukte der B-Zellen gut erhalten. Der Mechanismus der Degranulierung und Granulierung der B-Zellen war der gleiche wie er beim lebenden Tier beschrieben worden ist. Die Stärke der Sekretion war verschieden je nachdem, ob die Tiere nach einem zur Bewußtlosigkeit führendem Schlag getötet wurden oder ob ihnen eine tödliche Dosis eines Anaesthetikums injiziert wurde, und zwar war die Betazellsekretion im ersteren Fall stärker. — Diese Methode wird als geeignet angesehen, um mit ihr weitere Untersuchungen über den Machanismus der Synthese und Abgabe der Granula im Kaninchenpankreas durchzuführen.

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Copyright information

© Springer-Verlag 1966

Authors and Affiliations

  • Josë Gomez-Acebo
    • 1
  • Clemente Lopez-Quijada
    • 1
  • José Luis R-Candela
    • 1
  1. 1.Instituito „G. Marañon”Consejo Superior de Investigaciones CientíficasMadridSpain

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