Summary
Electron micrographs of ultrathin sections of salivary concretions showed needle-like Ca-phosphate formations with globular nuclei. Similar formations were observed in dentine, bone, and other hard tissues. We determined in the ground substance (a) the lengths of the needles as values for the length of the chain-like matrix backbone, (b) the distances between the dotlike nuclei within the needles as distances between the “active sites” of the chain-like matrix which induce the phosphate nucleation, and (c) the side distances between the close-packed, parallel needles as values for the distances between the parallel matrix backbones. The investigation of (b) and (c) was carried out by morphological measurement as well as by laser diffraction method on electron micrographs. The long needles of (a) (the length of the matrix backbone) reached values of more than 1,000 Å. Measurement of the distances between the small globular nuclei within the needles (b) gave values of 40 to 85 Å, and of those on the side distances of 37–75 Å. The values for (b) and (c) derived by laser diffraction appeared in the range of 37–54 Å, which was the lower range of the morphological values of (b) and (c). The results were analysed to discuss whether the main chain of the matrix is the proteinor the polysaccharide chain in the protein-polysaccharide or the glycoprotein. Corresponding measurements were carried out in areas within the bacteria and in the bacterial membrane.
Zusammenfassung
Elektronenmikroskopische Ultradünnschnittbilder vom Speichelstein zeigten — wie solche vom Dentin, Knochen usw. — nadelbzw. kettenförmige Ca-Phosphatbildungen mit globulären Keimen. Wir bestimmten in der Grundsubstanz a) die Länge der Nadeln als Werte für die Länge der kettenartigen Matrix, b) die Abstände zwischen den punktförmigen Keimen innerhalb der Nadeln als Wiedergabe der Abstände zwischen den aktiven Baugruppeneinheiten, die auf der Matrix die Mineralkeimbildung einleiten, und c) die Seitenabstände zwischen dicht zusammenliegenden, parallelen Ketten als Wiedergabe der Seitenabstände zwischen den Hauptsträngen der Matrix (s. Abb. 2). Die Bestimmungen zu b) und c) wurden sowohl über morphologische Vermessungen wie Laserbeugung an den elektronenmikroskopischen Platten durchgeführt. Die unter a) bezeichneten langen Nadeln (damit die Kettenlänge der Matrixleitstruktur) erreichten Werte über 1000 Å. Die unter b) bezeichneten morphologischen Vermessungen zwischen den Keimen ergaben Werte zwischen 40 und 85 Å und die unter c) bezeichneten Seitenabstände Werte zwischen 37 und 75 Å; die Laserbeugung führte zu Werten zwischen 37 und 54 Å, die also bevorzugt im unteren Bereich der morphologischen Vermessungen zu b) und c) lagen. Anhand dieser Meßdaten wurden erste Überlegungen darüber angestellt, ob die Leitstruktur in der organischen Matrix die Eiweiß- oder Polysaccharidkette im Proteinpolysaccharid bzw. Glykoprotein ist. Entsprechende Untersuchungen wurden auch innerhalb der Bakterien und der Bakterienmembran durchgeführt.
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Literatur
Anderson, A. J.: Some studies on the relationship between sialic acid and the mucopolysaccharideprotein complexes in human cartilage. Biochem. J. 82, 372–381 (1962).
Andrews, A. T. de B., Herring, G. M.: Further studies on bone sialoprotein. Biochim. biophys. Acta (Amst.) 101, 239–241 (1965).
Ascenzi, A., Bonucci, E., Bocciarelli, D. Steve: An electron microscope study on primary periosteal bone. J. Ultrastruct. Res. 18, 605–618 (1967).
Bonucci, E.: Fine structure of early cartilage calcification. J. Ultrastruct. Res. 20, 33–50 (1967).
—: Further investigation on the organic/inorganic relationship in calcifying cartilage. Calc. Tiss. Res. 3, 38–54 (1969).
Buddecke, E., Kröz, W., Tittor, W.: Chondroitinsulfat-Protein aus Rindernasenknorpel—Beziehungen zwischen makromolekularen Eigenschaften und Funktion. Hoppe-Seylers Z. physiol. Chem. 348, 651–664 (1967).
Carmichael, D. J., Wang, E. T., Veis, A.: The isolation of non-collagen protein moiety from dentin collagen. Calc. Tiss. Res. 2, Suppl. 17 (1968).
Herring, G. M.: Studies on the protein-bound chondroitine sulphate of bovine cortical bone. In: Gaillard, P. J., van den Hoof, A., and Steendijk, R., Fourth European Symposium on Calcified Tissues, Int. Congr. Ser. 120, p. 51–52. Amsterdam: Excerpta Medica Foundation 1966.
—: The chemical structure of tendon, cartilage, dentine and bone matrix. Clin. Orthop. 30, 261–299 (1968).
- Persönliche Mitteilung (1970).
Hjertquist, S. O., Vejlens, L.: The glycosaminoglycans of compact bone tissue and epiphyseal cartilage in normal dogs and in dogs treated with parathyroid extract. In: Gaillard, P. J., van den Hoof, A., and Steendijk, R., Fourth European Symposium on Calcified Tissues, Int. Congr. Ser. 120, p. 55–56. Amsterdam: Excerpta Medica Foundation 1966.
Hohling, H. J.: Die Bauelemente von Zahnschmelz und Dentin aus morphologischer, chemischer und struktureller Sicht. Habilitationsschrift in der Medizinischen Fakultät der Universität Münster, 1964. München: Carl Hanser 1966.
— Hall, T. A., Boothroyd, B., Cook, C. J., Duncumb, P., Fearnhead, R. W., Fitton-Jackson, S.: Electronprobe studies of prestages of apatite formation in bone and aorta. In: Les Tissues Calcifiés (Milhaud, G., M. Owen, and H. J. J. Blackwood, eds.). p. 323–328. Paris: Société d'Edition d'Enseignement Supérieur 1968.
—, Fitton-Jackson, S.: Untersuchungen der Vorstadien der Knochenbildung mit Hilfe der normalen und elektronenmikroskopischen Electronprobe x-ray microanalysis. Naturwissenschaften 54, 142–143 (1967).
- - Boyde, A., Rosenstiel, A. P. von: Combined electronprobe and electron diffraction analysis of prestages and early stages of dentine formation in rat incisors. Calc. Tiss. Res. 2, Suppl. 5 (1968).
—, Pfefferkorn, G., Radicke, J., Vahl, J.: Electronenmikroskopische Untersuchungen zur organischen Matrix und Kristallbildung in menschlichen Speichelsteinen. Dtsch. zahnärztl. Z. 24, 663–670 (1969).
— Schöpfer, H.: Morphological investigations of apatitic nucleation in hard tissues and salivary stone. Naturwissenschaften 55, 545 (1968).
— Themann, H., Vahl, J.: Collagen and apatite in hard tissues and pathological formations from a crystal chemical point of view. Third European Symp. on Calcified Tissues, Davos 11.-16. April 1965. In: Calcified Tissues, Proceedings of the Third European Symposium on Calcified Tissues, p. 146–151. Berlin-Heidelberg-New York: Springer 1966.
Kreilos, R.: Morphologische Abstandsmessungen an den Ca-Phosphat-Keimen in Nadeln und Ketten bei der Kollagenmineralisierung. Med. Dissertation. Münster 1970.
Leaver, A. G., Shuttleworth, C. A.: The isolation from human dentine and ox bone of phosphate-containing peptides. Arch. oral Biol. 11, 1209–1211 (1966).
Mathews, M. B., Lozaityte, J.: Sodium chondroitin sulfate-protein complexes of cartilage. I. Molecular weight and shape. Arch. Biochem. 74, 158–174 (1958).
Meyer, K., Davidson, E., Linker, A., Hoffmann, P.: The acid mucopolysaccharides of connective tissue. Biochim. biophys. Acta (Amst.) 21, 506–518 (1956).
Partridge, S. M.: Chondroitin sulfate-protein of bovine cartilage. Fed. Proc. 25, 994–996 (1966).
Reimer, L.: Änderung des elektronenmikroskopischen Bildkontrastes beim Übergang amorph-kristallin und flüssig-kristallin. Naturwissenschaften 49, 1 (1962).
Reimer, L.: Contrast in amorphous and crystalline objects. In: Quantitative electronmicroscopy, Proceedings of a Symposium on “Quantitative Electronmicroscopy” in the Armed Forces Institute of Pathology (1964). Lab. Invest. 14, 939–945 (1965).
Rogers, H. J.: Concentration and distribution of polysaccharides in cortical bone and dentine of teeth. Nature (Lond.) 164, 625–626 (1949).
Scherft, J. D.: The ultrastructure of the organic matrix of calcified cartilage and bone in embryonic mouse radii. J. Ultrastruct. Res. 23, 333–343 (1968).
Scholz, F.: Morphologische Abstandsmessungen an den Ca-Phosphatkeimen im gerade mineralisierten Dentin von Rattenschneidezähnen. Med. Dissertation, Münster, 1970.
Serafini-Fracassini, A., Smith, J. W.: Observations on the morphology of the proteinpolysaccharide complex of bovine nasal cartilage and its relationship to collagen. Proc. roy. Soc. B 165. 440–449 (1966).
Sharon, N.: The bacterial cell wall. Sci. Amer. 220, No. 5, 92–98 (1969).
Termine, J. D., Posner, A. S.: Amorphous/crystalline interrelationship in bone mineral. Calc. Tiss. Res. 1, 8–23 (1967).
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Herrn Prof. Dr. L. Reimer und Herrn cand. phys. H. G. Heine, Physikalisches Institut der Universität Münster, danken wir für die Durchführung der Laserbeugungs-Untersuchungen und für wertvolle Diskussionen, Fräulein Gisela Rehsöft für sorgfältige Assistenz. Mit Unterstützung durch die Deutsche Forschungsgemeinschaft.
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Höhling, H.J., Schöpfer, H. & Neubauer, G. Elektronenmikroskopie und Laserbeugungs-Untersuchungen zur Charakterisierung der organischen Matrix im Speichelstein und Hartgewebe. Z. Zellforsch. 108, 415–430 (1970). https://doi.org/10.1007/BF00336528
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DOI: https://doi.org/10.1007/BF00336528