Zum Histochemischen Nachweis Der Aldehyd-Dehydrogenase

Summary

A method is described for the histochemical determination of aldehyde dehydrogenase. The incubation medium contains: phosphate buffer, 0.06 m, pH 7.0, 8.0 ml; NaN₃ in 0.06 m phosphate buffer, pH 7.0, 0.1 m, 1.0 ml; acetaldehyde, 1.0 m, 1.0 ml; Nitro-BT 2.5 mg; MgCl₂·6H₂O, 10 mg; NAD, 11 mg. Tris is not suitable as a buffer as the amino group of the buffer substance combines with the carbonyl group of the acetaldehyde to form azomethine. The consequence is a change in the pH value and a decrease in the concentration of the substrate. KCN should not be used to block the respiratory chain as it also influences the concentration of the substrate through the formation of cyanhydrin.

Zusammenfassung

Es wird eine Methode zum histochemischen Nachweis der Aldehyd-Dehydrogenase beschrieben. Das Inkubationsgemisch setzt sich folgendermaßen zusammen: Phosphatpuffer, 0,06 m, pH 7,0, 8,0 ml; NaN₃ in 0,06 m Phosphatpuffer, pH 7,0, 0,1 m, 1,0 ml; Acetaldehyd, 1,0 m, 1,0 ml; Nitro-BT, 2,5 mg; MgCl₂·6H₂O, 10 mg; NAD, 11 mg. Tris erwies sich zur Pufferung des Inkubationsgemisches als ungeeignet, weil die Aminogruppe der Puffersubstanz mit der Carbonylgruppe des Acetaldehyds zu einem Azomethin reagiert. Dadurch kommt es zur Änderung des pH-Wertes und zur Erniedrigung der Substratkonzentration. KCN sollte zur Blockierung der Atmungskette bei diesem Nachweis nicht angewendet werden, da infolge Cyanhydrinbildung ebenfalls die Substratkonzentration vermindert wird.