Summary
Corresponding to the requirements of the electron microscopical immunohistochemistry the chemical properties of useful labelling substances are discussed. Basing upon this new ways for synthesis of metallorganic substances, which come up to this requirements, are developed. Their applicability for labelling is examined by experiments. Investigations of the electron microscopical visualization of the antigen-antibody-complexes are made. The present positive results are in accordance with the chemical structure of the labelling substance. 3-Carboxy-4-ferrocenylphenylisothiocyanate fulfils the conditions, which were formulated at the beginning of this investigations.
Zusammenfassung
Entsprechend den Erfordernissen der elektronenoptischen Immunohistochemie werden die chemischen Eigenschaften brauchbarer Markierungssubstanzen erörtert. Darauf aufbauend werden Synthesewege für neue, diesen Anforderungen entsprechende metallorganische Verbindungen entwickelt. Deren Eignung zur Markierung wird experimentell erprobt, wozu Untersuchungen über den eigentlichen Markierungsvorgang, die Konjugatreinigung und -konzentrierung sowie über die elektronenoptische Darstellbarkeit der Antigen-Antikörper-Reaktionsprodukte durchgeführt werden. Die bisherigen positiven Ergebnisse lassen sich aus der chemischen Struktur der Markierungssubstanz ableiten und begründen. 3-Carboxy-4-ferrocenylphenylisothiocyanat erfüllt die an den Anfang der Untersuchungen gestellten Kriterien.
This is a preview of subscription content, log in via an institution to check access.
Similar content being viewed by others
Literatur
Broadhead, G. D., and P. L. Pauson: Ferrocen derivates. Part II. Arylation. J. chem. Soc. 1955, S. 367–370.
Coons, A. H., H. J. Creech, and R. N. Jones: Immunological properties of an antibody containing fluorescent group. Proc. Soc. exp. Biol. (N.Y.) 47, 200–202 (1941).
Franz, H.: Ferrocen-markierte Proteine. Naturwissenschaften 54, 339 (1967a).
: Darstellung und Eigenschaften von p-Ferrocenylisothiocyanat. Z. Chem. 7, 235–236 (1967b).
: Proteinmarkierung mit 3-Carboxy-4-ferrocenylphenylisothiocyanat. Z. Chem. 7, 427–428 (1968).
: Nachweis geringer Mengen gewebsfixierten Silbers. Histochemie 12, 227–229 (1968).
: Nachweis von sauren Mukopolysacchariden in Mastzellen mit Sudanschwarz B nach Invertseifenbehandlung. Histochemie 10. 287–292 (1967e).
, u. G. Holle: Zum indirekten Nachweis nichtlipoider Substanzen durch Sudanschwarz B. Histochemie 5, 163–169 (1965).
Gelius, R., W. Uhlmann u. W. Sperling: Eine ergiebige Laboratoriumsmethode zur Herstellung von Ferrocen. Z. Chem. 6, 227–228 (1966).
Hopkins, S. J., and A. Wormall: Phenylisocyanate protein compounds and their immunological properties. Biochem. J. 27, 740–753 (1933).
Jach, J., and N. Sutin: The Szilard-Chalmers reaction in Ferricinium picrate. J. Inorg. Nucl. Chem. 7, 5–7 (1958).
Kealy, T. J., and P. L. Pauson: A new type of organo-iron compound. Nature (Lond.) 168, 1039–1040 (1951).
Müller, S. A., A. Tebboth, and J. F. Tremaine: Dicyclopentadienyliron. J. chem. Soc. 1952, S. 632–635.
Nesmejanow, A. N., R. W. Golowina u. L. S. Shilowtsewa: Über Arylferrocene und Ferrocenylamin. Ber. Akad. Wiss. UdSSR 102, 535–538 (1955).
, E. J. Perewalowa u. R. W. Golowina: Umsetzungen von Ferrocen mit Diazoverbindungen. Ber. Akad. Wiss. UdSSR 99, 539–542 (1954).
Riggs, J. L., R. J. Seiwald, J. G. Burckhalter, C. M. Downs, and T. J. Metcalf: Isothiocyanate compounds as fluorescent labelling agents for immune serum. Amer. J. Path. 34, 1081–1097 (1958).
Rosenblum, M.: Chemistry of the iron group metallocens. Part I. New York-London-Sydney: Wiley 1965.
Schlögl, K.: Über Ferrocenaminosäuren und verwandte Verbindungen. Mh. Chem. 88, 601–621 (1957).
u. H. Seiler: Ferrocenyl-isocyanat. Naturwissenschaften 45, 337 (1958).
Seidler, E., K. Lunzenauer u. K. Henze: Modifikationen bei der Herstellung fluoreszenzmarkierter Antikörper für die Immunhistologie nach der Methode von Goldstein et al. Dtsch. Gesundh.-Wes. 19, 2063–2066 (1964).
Wilkinson, G.: Ferrocen. Org. Syn. 36, 31–35 (1956).
, F. A. Cotton, and J. M. Birmingham: On manganese cyclopentadienide and some chemical reactions of neutral bis-cyclopentadienyl metal compounds. J. Inorg. Nucl. Chem. 2, 95–113 (1956).
Author information
Authors and Affiliations
Additional information
Ferrocenmarkierte Proteine, IV. Mitteilung.
Rights and permissions
About this article
Cite this article
Franz, H. Grundlagen einer neuen Methode für die elektronenmikroskopische Immunohistochemie. Histochemie 12, 230–239 (1968). https://doi.org/10.1007/BF00306000
Received:
Issue Date:
DOI: https://doi.org/10.1007/BF00306000