Zusammenfassung
-
1.
Die Methylenblaubindung von 20 Lipiden als Modellsubstanzen und einigen Mischungen mit wechselndem Anteil der Komponenten wurde geprüft. Einige von ihnen wurden auch mit Nilblausulfat und Methylviolett bei verschiedenem pH gefärbt.
-
2.
Nur saure Lipide lassen sich als Modellsubstanzen mit basischen Farbstoffen anfärben, saure Phosphatide allgemein stärker als freie Fettsäuren. Durch Methylveresterung saurer Gruppen ließ sich die Methylenblaubindung aufheben oder erheblich abschwächen.
-
3.
Ausgeprägte Basophilie bis pH 2,0 kennzeichnet Glyzerinphosphatide, Methylenblaubindung bis etwa pH 4,0 flüssige oder halbfeste freie Fettsäuren.
-
4.
Unter den Phosphatiden zeigen Glyzerinphosphatide eine starke und Sphingomyeline nur eine schwache, Cerebroside dagegen keine Methylenblaubindung.
-
5.
In Gemischen mit Tristearin sind mindestens 30% Phosphatide und 20% Fettsäuren für eine Methylenblaubindung erforderlich. Im Gemisch hängt nicht nur die Farbintensität, sondern auch der pH-Bereich vom prozentualen Anteil saurer Lipide ab.
-
6.
Die Methylenblaubindung wird auch durch den Aggregatzustand, d. h. durch Kettenlänge und Zahl der Doppelbindungen, wesentlich beeinflußt. Feste saure Lipide färben sich nicht mit basischen Farbstoffen oder nur bei erhöhter Temperatur.
-
7.
Auch Färbungen mit Nilblausulfat und Methylviolett hängen entscheidend vom pH der Lösung ab. Bei allen Lipidfärbungen mit basischen Farbstoffen muß das pH beachtet werden.
This is a preview of subscription content, log in via an institution to check access.
Literatur
Banghahm, A. D.: Physical structure and behaviour of lipids and lipid enzymes. In: Advances in lipid research, Vol. 1, p. 84. New York: Academic Press 1963.
Böhm, P., u. G. Richarz: Zur quantitativen Bestimmung von Inosit in Phosphatiden. Hoppe-Seylers Z. physiol. Chem. 298, 110–120 (1954).
Boeminghaus, H.: Über den Wert der Nilblaumethode für die Darstellung der Fettsubstanzen und den Einfluß einer längeren Formalinfixierung auf den Ausfall der Färbung. Beitr. path. Anat. 67, 533–538 (1920).
Cain, A. J.: The use of Nile Blue in the examination of lipoids. Quart. J. micr. Sci. 88, 383–392 (1947).
Diezel, P. B.: Die Stoffwechselstörungen der Sphingolipoide. Berlin-Göttingen-Heidelberg: Springer 1957.
Haas, G. H. de, and L. L. M. van Deenen: Synthetic mixed-acid kephalins; hydrolysis by „phospholipase A“ and some properties of their sodium salts. Biochem. J. 81, 34P-35P (1961).
—: The site of action of phosphatide acyl-hydrolase on mixed-acid phosphatides containing a poly-unsaturated fatty acid. Biochim. biophys. Acta (Amst.) 65, 260–270 (1962).
Hanahan, D. J., J. D. Dittmer, and E. Warashina: A column chromatographic separation of classes of phospholipides. J. biol. Chem. 228, 685–700 (1957).
Jatzkewitz, H.: Eine neue Methode zur quantitativen Ultramikrobestimmung der Sphingolipoide aus Gehirn. Hoppe-Seylers Z. physiol. Chem. 326, 62–64 (1961).
Kaller, H.: Präparative Gewinnung von Sphingosinphosphorylcholin. Biochem. Z. 334, 451–461 (1961).
Kaufmann, C., u. E. Lehmann: Sind die in der histologischen Technik gebräuchlichen Fettdifferenzierungsmethoden spezifisch? Virchows Arch. path. Anat. 261, 623–648 (1926).
Kaufmann, H. P.: Studien auf dem Fettgebiet. Z. Untersuch. Lebensmitt. 51, 3–12 (1926). Mod. von W. Trappe: Modifikation der Jodzahlbestimmungsmethode nach H. P. KaufMann für kleine und kleinste Fettmengen. Biochem. Z. 296, 184–185 (1938).
Kawamura, R.: Die Cholesterinesterverfettung. Jena: Gustav Fischer 1911.
Klenk, E., u. F. Leupold: Über eine vereinfachte Methode zur Darstellung von phosphorfreien Cerebrosiden und über die als Spaltprodukte auftretenden Fettsäuren. Hoppe-Seylers Z. physiol. Chem. 281, 208 (1944).
Lennert, K., u. G. Weitzel: Zur Spezifität der histologischen Fettfärbungsmethoden. Z. wiss. Mikr. 61, 20–29 (1952).
Long, C., and I. F. Penny: The structure of the naturally occurring phosphoglycerides, 3. (Action of moccasin-venom phospholipase A on ovolecithin and related substances.) Biochem. J. 65, 382–389 (1957).
Pischinger, A.: Die Lage des isoelektrischen Punktes histologischer Elemente als Ursache ihrer verschiedenen Färbbarkeit. Z. Zellforsch. 3, 169–197 (1926).
—: Diffusibilität und Dispersität von Farbstoffen und ihre Beziehung zur Färbung bei verschiedenen H-Ionen-Konzentratione. Z. Zellforsch. 5, 347–385 (1927).
Rhodes, D. N., and C. H. Lea: Phospholipids, 4. (On the composition of hen's egg phospholipids.) Biochem. J. 65, 526–533 (1957).
Rouser, G., A. J. Bauman, G. Kritchevsky, D. Heller, and J. O'Brien: Quantitative chromatographic fractionation of complex lipid mixtures: brain lipids. J. Amer. Oil chem. Soc. 38, 644–550 (1961).
Sinapius, D.: Über Präparations- und Fixationsveränderungen an Fetttropfen der menschlichen Leber. Zbl. allg. Path. path. Anat. 105, 23–37 (1963).
Smith, J. L.: On the simultaneous staining of neutral fat and fatty acids by oxazine dyes. J. Path. Bact. 12, 1 (1908).
Thannhauser, S. J., and F. Boncoddo: The chemical nature of the fatty acids of brain and spleen sphingomyelin. J. biol. Chem. 172, 142 (1948).
Thiele, O. W., u. G. Kröber: Die Lipide der Weinbergschnecke. III. (Über die Fettsäuren der acetonlöslichen Lipide.) Hoppe-Seylers Z. physiol. Chem. 334, 69 (1963).
—, u. W. Wober: Zur papierchromatographischen Trennung von Phosphatiden auf einem neuartigen Kieselgelpapier. Hoppe-Seylers Z. physiol. Chem. 326, 89–93 (1961).
Author information
Authors and Affiliations
Rights and permissions
About this article
Cite this article
Sinapius, D., Thiele, O.W. Über die Methylenblaubindung von Lipiden Untersuchungen an Modellsubstanzen. Histochemie 4, 553–562 (1965). https://doi.org/10.1007/BF00281908
Received:
Issue Date:
DOI: https://doi.org/10.1007/BF00281908