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Histologische und spektralphotometrische Untersuchungen zur Bestimmung der „Stärke der Metachromotropie“ mit Dichlorpseudoisocyanin

Histological and spectrophotometrical investigations to determine the “strength of metachromotropy” by dichlorpseudoisocyanine

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Summary

Dichlorpseudoisocyanine (DPI) was tested in vitro spectrophotometrically in view of its metachromatic effects. After the addition of one of the substrates heparin, chondroitin sulfate or polyron a marked metachromatic maximum is noted near 585–600 nm. This metachromatic absorption band is depressed by H+-ions, neutral salts, alcohol and the dilution of the dye-stuff. In test series it was shown that in this respect the DPI-heparincomplex is much more resistant than the complexes with chondroitin sulfate or polyron.

Histological preparations in analogical test series showed that various acid components of the tissue possess a different “strength of metachromotropy” against DPI. Mast cells containing heparin proved most resistant against factors irritating metachromasia; they are followed by cartilage ground substance and glandular mucins.

DPI-metachromasia is a valuable test to classify different acid tissue components with regard to their “strength of metachromotropy”. The advantage of this method in comparison with toluidine blue or acridine orange metachromasia is, that tissue components stained metachromatically with dichlorpseudoisocyanine may be documented successfully in black and white photographs by the use of a line filter (579 nm).

Zusammenfassung

Dichlorpseudoisocyanin (DPI) wurde hinsichtlich seines metachromatischen Verhaltens in vitro spektralphotometrisch geprüft. Nach Zugabe eines der Substrate Heparin, Chondroitinsulfat oder Polyron bildet sich im Bereich von 585–600 nm eine metachromatische Absorptionsbande aus. Diese wird durch Wasserstoffionen, Neutralsalze, Alkohol sowie Farbstoffverdünnung unterdrückt. In diesbezüglichen Testreihen erweist sich der DPI-Heparin-Komplex als wesentlich resistenter als ein entsprechender DPI-Chondroitinsulfatoder DPI-Polyron-Komplex.

In analog angelegten Testreihen am histologischen Schnitt konnte gezeigt werden, daß die einzelnen sauren Gewebskomponenten gegenüber DPI eine unterschiedliche Stärke der Metachromotropie haben. Als am stärksten resistent gegen Störfaktoren erweisen sich die Heparin enthaltenden Mastzellen, gefolgt von Knorpelgrundsubstanz und Drüsenschleim.

Die DPI-Metachromasie eignet sich gut zur Klassifizierung saurer Gewebskomponenten aufgrund der unterschiedlichen Stärke der Metachromotropie. Ihr Vorteil gegenüber der Toluidinblau- oder Acridinorange-Metachromasie liegt vor allem darin, daß die mit Dichlorpseudoisocyanin metachromatisch gefärbten Gewebskomponenten unter Verwendung eines Linienfilters (579 nm) auch im Schwarzweiß-Bild einwandfrei dokumentiert werden können.

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Reutter, K., Takahashi, H. & Graumann, W. Histologische und spektralphotometrische Untersuchungen zur Bestimmung der „Stärke der Metachromotropie“ mit Dichlorpseudoisocyanin. Histochemie 24, 187–196 (1970). https://doi.org/10.1007/BF00277611

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