Zusammenfassung
Es wird eine Methode zur kontinuierlichen Bestimmung aller vier Pyridinnucleotide (NAD, NADP, NADH, NADPH) in neutralen Organextrakten beschrieben, für die nur insgesamt 4 ml Extrakt benötigt wird.
Mit dieser Methode wurde der Gehalt an Pyridinnucleotiden (PN) in Leber und Niere unbehandelter weiblicher Ratten bestimmt.
Untersuchungen über die Stabilität der PN in neutralen Extrakten ergaben, daß in Organen mit hohem Gehalt an oxydiertem Glutathion die reduzierten PN leicht oxydiert werden können. Das kann durch Erhöhung der Cysteinkonzentration in der Extraktionslösung und Extrahieren bei 0°C verhindert werden.
In den neutralen Extrakten von Leber und Niere ist kein „säurelabiles NADP“ nachweisbar.
Summary
A method has been described permitting successive determination of the four pyridine-nucleotides (NAD, NADP, NADH, NADPH) in one tissue-extract (pH 7.2) the volume of which may be restricted to 4 ml.
Using this method the concentration of pyridine-nucleotides have been measured in liver and kidney of female albino rats.
Studies on the stability of pyridine nucleotides in neutral extracts have revealed that reduced pyridine-nucleotides may easily be oxidized in extracts from tissue containing large amounts of oxidized glutathione. This error can be prevented by increasing cysteine concentration of the extract and keeping its temperature at 0°C.
No “acid-labile” NADP has been detected in neutral extracts from liver and kidney.
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Neuhoff, V., Desselberger, E. Bestimmung und Stabilität von Pyridinnucleotiden in Organextrakten. Naunyn - Schmiedebergs Arch 252, 43–49 (1965). https://doi.org/10.1007/BF00246428
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