Peroxidase activity in traumatic skin lesions

Summary

Peroxidase activity was determined in experimental compression-excoriation lesions and incision wounds of rat skin after different periods of vital time. The peroxidase enzyme was extracted from the tissues by homogenization in 0.5% cetyltrimethylammoniumbromide, and the enzyme activity was measured from the supernatant by o-dianisidine-H₂O₂ assay. In the blood of the rats a mean activity of approx. 5.26±1.11 U/g dry weight was observed. In the control specimens of the skin the activity was very low and generally below the detection limit of the methods used. In 30-min-old compression-excoriation lesions the mean peroxidase activity was 0.38±0.21 U/g dry weight. In lesions older than 30 min the activity started to increase rapidly. In 4-h-old compression-excoriation lesions it was 10 times higher than the 30-min level and was 40 times higher in 12-h-old lesions and 70–100 times higher in 1–3-day-old compression-excoriation lesions, respectively. In 30-min-old incision wounds the mean peroxidase activity was 0.65±0.37 U/g dry weight. The increase of the activity compared with the 30-min level was even faster in the incision wounds: in 4-h-old wounds the mean activity was 50 times higher, in 12-h-old wounds 200 times higher and in those of 1–5 days it was several hundreds of times higher. Compression-excoriation lesions made after death showed activity similar to the control specimens. Postmortem autolysis at +22°C resulted in a loss of the enzyme activity in 1-day-old compression-excoriation lesions so that after 3 days approx. 80% remained, and after 5 and 7 days approx. 40% was present. After 3 days of autolysis at +4°C, nearly 100% of the activity remained and approx. 90% was present after 5 and 7 days of autolysis. Increased peroxidase activity was also detectable in human vital excoriations in the specimens which were taken in autopsies several days postmortem.

Zusammenfassung

Die Peroxidaseaktivität wurde in kombinierten Quetsch-und Abschürfungsverletzungen sowie in Schnittwunden der Haut von Ratten nach verschieden langen vitalen Reaktionszeiten bestimmt. Das Enzym wurde durch Homogenisierung in 0,5% iger Cetyltrimethylammoniumbromidlösung aus dem Gewebe extrahiert. Aus dem Supernat wurde die Peroxydaseaktivität nach dem o-Dianisidin-Wasserstoffperoxydverfahren bestimmt. Für das Rattenblut ergab sich der Durchschnittswert 5,26±1,11 Einh. Peroxydaseaktivität je g Trockengewicht. Dagegen lag die Aktivität von Kontrollproben der Rattenhaut mit den hier verwendeten Verfahren meistens unter der Bestimmungsgrenze. Die 30 min alten Quetsch- und Abschürfverletzungen wiesen sämtlich Enzymaktivität auf, Durchschnittswert 0,38±0,21 Einh. je g Trockengewicht. Die Aktivität stieg im weiteren Zeitverlauf rasch an und betrug im Vergleich mit dem 30 min-Niveau etwa das 10fache bei den 4h alten Verletzungen, etwa das 40fache bei den 12 Stunden alten sowie etwa das 70 bis 100fache bei den 1–3 Tage alten Verletzungen. In den 30 min alten offenen Schnittwunden erreichte die Aktivität im Durchschnitt 0,65±0,37 Einh. je g Trockengewicht; anschließend daran nahm die Aktivität relativ schneller zu, und zwar war sie im Durchschnitt bei 4h alten Schnittwunden etwa 50fach im Vergleich mit dem Niveau nach 30 min, bei den 12h alten etwa 200fach und bei denjenigen mit einem Alter von 1 bis 5 Tage mehrere hundertfach. Bei den postmoralen Quetsch- und Schürfverletzungen wurden entsprechende Aktivitäten wie im Kontrollgewebe festgestellt. Autolyse bei +22°C verminderte die Peroxidaseaktivität der 1 Tage alten Quetsch- und Schürfverletzungen in der Weise, daß nach Verlauf von 3 Tagen noch etwa 80% sowie nach 5 und 7 Tagen etwa 40% der Ausgangsaktivität übrig waren. Bei +4°C dagegen waren nach 3 Tagen etwa 100% sowie nach 5 und 7 Tagen etwa 90% erhalten. Ein Anstieg der Peroxidaseaktivität war ebenfalls im Obduktionsmaterial von humanen vitalen Schürfverletzungen der Haut nachweisbar, die mehrere Tage postmortal entnommen waren.