Histochemie

, Volume 5, Issue 2, pp 154–162 | Cite as

Beitrag zur Fettspezifität des Sudanschwarz B und Anderer Roter Sudanfarbstoffe bei Reinsubstanzen

  • Herbert J. Schott
  • Wilhelm Schoner
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Zusammenfassung

Auf Filterpapier aufgetragene Reinsubstanzen (Lipide, Eiweißsubstanzen und Polysaccharide) wurden mit Sudan III, Sudan IV, Sudanrot B, Sudanrot VII B, Scharlach R med und Sudanschwarz B (SSB) gefärbt.
  1. 1.

    Von den geprüften Sudanfarbstoffen färbt nicht Sudanschwarz B, sondern das Sudanrot VII B die meisten Lipide an. Es hat aber auch zugleich die größte Fettunspezifität.

     
  2. 2.

    Die geringste Lipidunspezifität zeigt Sudan IV, dann folgen Scharlach R med und Sudanschwarz B.

     
  3. 3.

    Die einzelnen Lösungsmittel beeinflussen die Färbebreite des Sudanschwarz B in hohem Maße:

     
  1. a)

    Fette werden am meisten von SSB-Diacetin, von der chromatographisch blauen Fraktion des SSB (Äthanol) und von SSB-Propylenglykol erfaßt.

     
  2. b)

    Eiweißsubstanzen tingieren sich besonders mit SSB-Propylenglykol; mit Abstand folgen dann kolloidales SSB-Äthanol, SSB-Triäthylphosphat und die chromatographisch blaue Fraktion des SSB (Äthanol).

     
  3. c)

    Polysaccharide werden am stärksten von der blauen chromatographischen Fraktion des SSB (Äthanol), dem SSB-Propylenglykol und dem kolloidalen SSB-Äthanol angefärbt.

     
  4. 4.

    „Fixation” (Formalin) und saure Hydrolyse der Reinsubstanzen erhöhen die Färbebreite des SSB bei Fetten, Eiweißsubstanzen und Polysacchariden.

     
  5. 5.

    Die Sudanfarbstoffe lassen sicht trotz dieser Einwände in der Routinehistologie zur Darstellung „freier” Fette verwenden, wenn man Äthanol bzw. Isopropanol als Lösungsmittel benutzt. Das Propylenglykol ist als Lösungsmittel für SSB völlig abzulehnen.

     

Summary

Pure substances (lipids, proteins, and polysaccharides) are applied to filterpaper and stained with Sudan III, Sudan IV, Sudan red B, Sudan red VII B, Scharlach R med, and Sudan black B (SSB).
  1. 1.

    Of all Sudan dyes under test it is not only Sudan black B, but also Sudan red VII B, that stains most of the lipids. It shows, however, also the highest unspecificity for fat.

     
  2. 2.

    Sudan IV shows hardly any unspecific reaction with lipids; Scharlach R med and Sudan black B give almost the same results.

     
  3. 3.

    Some solvents have a great influence on the activity range of Sudan black B.

     
  1. a)

    The highest specificity for fat is found using SSB-diacetin, the chromatographical blue fraction of SSB (Ethanol) or SSB-propylene glycol.

     
  2. b)

    A high specificity for proteins is found with SSB-propylene glycol; a not as good reaction is obtained with colloidal SSB-ethanol, SSB-triethylene phosphate and the ohromatographical blue fraction of SSB (Ethanol).

     
  3. c)

    Polysaccharides are most intensely stained with the chromatographical blue fraction of SSB (Ethanol), SSB-propylene glycol and colloidal SSB-ethanol.

     
  4. 4.

    “Fixation” (formalin) and acid hydrolysis of the pure substances increase the staining range of SSB for fats, proteins, and polysaccharides.

     
  5. 5.

    Inspite of these objections Sudan dyes can be used in routine histology for the demonstration of “free” fat, provided ethanol or isopropanol are used as solvents. Under no circumstances should propylene glycol be used as solvent for SSB.

     
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Literatur

  1. Barrollier, J., u. G. Suchowsky: Betrachtungen über Lipoidfarbstoffe und eine neue Methode einer Sudanfärbung. Acta histochem. (Jena) 5, 294–296 (1958).Google Scholar
  2. Berenbaum, M. C.: The histochemistry of bound lipide. Quart. J. micr. Sci. 99, 231–242 (1958).Google Scholar
  3. Bermes jr., E. W., and H. J. Mcdonald: Fractionation and characterization of the lipide stain, Sudan black B. Arch. Biochem. 70, 49–57 (1957).Google Scholar
  4. Brock, B., R. E. Stowell, and K. Couch: Staining of intranuclear lipide of mouse liver under different conditions and growth. Lab. Invest. 1, 439–446 (1952).Google Scholar
  5. Casselmann, W. G. B.: Acetyladed Sudan black B as a more specific histochemical reagent for lipides. Quart. J. micr. Sci. 95, 321–322 (1954).Google Scholar
  6. Chiffelle, Th. L., and Fr. A. Putt: Stain Technol. 26, 51 (1951). Zit. nach Harms 1957.Google Scholar
  7. Diezel, P. B.: Die Stoffwechselstörungen der Sphingolipoide. Berlin-Göttingen-Heidelberg: Springer 1957.Google Scholar
  8. —, u. G. Neimanis: Über den Metachromasieeffekt von Sudanschwarz B. Virchows Arch, path. Anat. 330, 619–628 (1957).Google Scholar
  9. —:Über Farbveränderungen von Azofarbstoffen. Ein Beitrag zum Problem der Metachromasie. Histochemie 1, 151–170 (1959).Google Scholar
  10. Fredricsson, B.: Staining of freeze-dried tissue with Sudan black B after embedding in polyethylene glycol. Acta morph. neerl.-scand. 1, 377–383 (1958).Google Scholar
  11. — T. C. Laurent and B. Lüning: Decomposition of Sudan black B causing an artefact in the staining of lipide. Stain Technol. 33, 155–158 (1958).Google Scholar
  12. Gomori, G.: Zit. nach Lison 1953.Google Scholar
  13. Harms, H.: Handbuch der Farbstoffe für Mikroskopie. II. Teil, 1. Liefg 1957, I. Teil, 1. Liefg 1959. Kamp-Lintfort: Staufen.Google Scholar
  14. Kutt, H., D. Lockwood, and F. Mcdowell: The lipid and protein staining properties of Sudan II, III and IV and their components. Stain Technol. 34, 197–202 (1959).Google Scholar
  15. — Decomposition of Sudan black B ultraviolet light and gases, its lipid and protein staining properties. Stain Technol. 34, 203–208 (1959).Google Scholar
  16. Leach, E. H.: Fat staining with sudan black B. J. Path. Bact. 47, 635–636 (1938).Google Scholar
  17. Lennert, K., u. G. Weitzel: Zur Spezifität der histologischen Fettfärbungsmethoden. Z. wiss. Mikr. 61, 20–29 (1952).Google Scholar
  18. Lillie, R. D., and H. J. Burtner: Stable sudanophilia of human neutrophil leucocytes in relation to peroxydase and oxydase. J. Histochem. Cytochem. 1, 8–26 (1953).Google Scholar
  19. Lison, L.: Sur des nouveaux colorants histologiques spezifiques des lipids. C. R. Soc. Biol. (Paris) 115, 202–205 (1934).Google Scholar
  20. — Histochemie et cytochimie animales. Paris: Gauthiers-Villars 1953.Google Scholar
  21. Schott, H. J.: Zur Histochemie der Fette im hyalinen Knorpel. Jahrestagg der nord- u. westdeutschen Pathologen vom 30. 9.-2. 10. 1960 in Kiel. Zbl. allg. Path. path. Anat. 102, 108–109 (1961).Google Scholar
  22. — Beitrag zur Anfärbung gebundener (maskierter) Lip(o)ide mit Sudanschwarz B. Histochemie 3, 138–149 (1962).Google Scholar
  23. — Zur Frage der histochemischen Fettspezifität des Sudanschwarz B und zur Methodik der Auftrennung seiner Fraktionen. Histochemie 3, 467–476 (1964).Google Scholar
  24. —, u. W. Schoner: Zur Frage der Abhängigkeit der Fettfärbung mit Sudanschwarz B vom pH des Lösungsmittels. Frankfurt. Z. Path. 73, 328–339 (1964).Google Scholar
  25. —, u. K. Schromm: Zur Frage der Metachromasie und Allochromasie des Sudanschwarz B. Acta histochem. (Jena) Suppl. 4, 206–210 (1964). Verh. Ges. Histochemie, VIII. Symp. in Wien v. 4.–6. 10. 1962.Google Scholar
  26. Serra, J. A.: Cytochemical demonstration of masked lipids. Science 128, 28–29 (1958).Google Scholar
  27. Sinapius, D.: Zur Darstellung maskierter Fette der Leber. Verh. Dtsch. Ges. Path. 45. Tagg vom 23.-27. 5. 1961 in Münster, S. 297–299. Stuttgart: Gustav Fischer 1961.Google Scholar
  28. Swahn, B.: Studies on blood lipids. Scand. J. clin. Lab. Invest. (Lund) 5, Suppl. 9 (1953).Google Scholar
  29. Zeiger, K.: Physikochemische Grundlagen der histologischen Methodik. Dresden u. Leipzig: Theodor Steinkopff 1938.Google Scholar

Copyright information

© Springer-Verlag 1965

Authors and Affiliations

  • Herbert J. Schott
    • 1
  • Wilhelm Schoner
    • 1
  1. 1.Pathologischen Institut der Universität MainzGermany

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