, Volume 31, Issue 2, pp 223-228

Gentamicin negatively influenced osteogenic function in vitro

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Abstract

Local delivery of gentamicin is an accepted method of infection prophylaxis in the surgery of open fractures. However, the few reports of studies into the effect of locally applied gentamicin on osteoblasts used inadequate methods. In our study, we used the well-characterised C2C12 cell line with reproducible differentiation pathway into the osteoblast lineage. We investigated the viability, cell number, alkaline phosphatase activity, and the expression of osteogenic genes of C2C12 cells after exposure to gentamicin at concentrations of 12.5–800 μg/ml for 48 h. Exposure of C2C12 cells to gentamicin (12.5–800 mg/ml) for 48 h showed no significant changes in the cell number, but cell viability was decreased by one-third at the tested concentrations of 200–800 μg/ml. The alkaline phosphatase activity was significantly decreased by one-third to one-half at any tested concentration (12.5–800 μg/ml) of gentamicin. Any tested concentration of gentamicin up to 800 μg/ml for 48 h did not inhibit or decrease the osteogenic gene expression of osterix and alkaline phosphatase of the C2C12 cells. In conclusion, gentamicin at high concentrations as achieved by local application reduced cellular viability and alkaline phosphatase activity in vitro and therefore may be detrimental for bone healing and repair in vivo.

Résumé

La délivrance locale de gentamycine est une méthode usuelle de prophylaxie de l’infection dans la chirurgie des fractures ouvertes. Il y a peu d’études fiables sur les effets de la gentamycine sur les ostéoblastes. Dans cette étude est utilisée la lignée C2C12 avec reproductibilité des voies de différenciation dans la lignée ostéoblastique. Nous avons étudié la viabilité, le nombre de cellules, l’activité phosphatase alcaline et l’expression des gènes ostéogèniques des cellules C2C12 après exposition pendant 48 heures à des concentrations de gentamycine de 12,5 μg/ml à 800 μg/ml. Il n’y avait pas de modification significative du nombre de cellules mais la viabilité était diminuée d’un tiers pour les concentrations de 200 à 800 μg/ml. L’activité phosphatase alcaline était diminuée d’un tiers à la moitié pour toutes les concentrations étudiées. Dans aucun cas il n’y avait diminution ou inhibition de l’expression génique de l’osterix ou de la phosphatase alcaline des cellules C1C12. En conclusion, la gentamycine à haute concentration réduit la viabilité cellulaire et l’activité phosphatase alcaline in vitro, ce qui est peut-être néfaste pour la cicatrisation osseuse in vivo.