Article

European Journal of Clinical Microbiology & Infectious Diseases

, 28:223

First online:

Diagnosis of invasive aspergillosis using bronchoalveolar lavage in haematology patients: influence of bronchoalveolar lavage human DNA content on real-time PCR performance

  • E. FréalleAffiliated withEA 3609, Département de Parasitologie-Mycologie, Faculté de Médecine, Pôle de Microbiologie, CHRU de Lille, Université de Lille 2, Laboratoire d’Ecologie du Parasitisme, Institut Pasteur de Lille Email author 
  • , K. DecrucqAffiliated withEA 3609, Département de Parasitologie-Mycologie, Faculté de Médecine, Pôle de Microbiologie, CHRU de Lille, Université de Lille 2, Laboratoire d’Ecologie du Parasitisme, Institut Pasteur de Lille
  • , F. BotterelAffiliated withLaboratoire de Parasitologie Mycologie, Hôpital Henri Mondor APHP et Université Paris 12
  • , B. BouchindhommeAffiliated withDépartement de Pathologie, CHRU de Lille, Université de Lille 2
  • , D. CamusAffiliated withEA 3609, Département de Parasitologie-Mycologie, Faculté de Médecine, Pôle de Microbiologie, CHRU de Lille, Université de Lille 2, Laboratoire d’Ecologie du Parasitisme, Institut Pasteur de Lille
  • , E. Dei-CasAffiliated withEA 3609, Département de Parasitologie-Mycologie, Faculté de Médecine, Pôle de Microbiologie, CHRU de Lille, Université de Lille 2, Laboratoire d’Ecologie du Parasitisme, Institut Pasteur de Lille
  • , J. M. CostaAffiliated withLaboratoire de Parasitologie Mycologie, Hôpital Henri Mondor APHP et Université Paris 12Laboratoire Pasteur-Cerba
  • , I. Yakoub-AghaAffiliated withEA 2686, Service des Maladies du Sang, CHRU de Lille, Université de Lille 2
  • , S. BretagneAffiliated withLaboratoire de Parasitologie Mycologie, Hôpital Henri Mondor APHP et Université Paris 12
    • , L. DelhaesAffiliated withEA 3609, Département de Parasitologie-Mycologie, Faculté de Médecine, Pôle de Microbiologie, CHRU de Lille, Université de Lille 2, Laboratoire d’Ecologie du Parasitisme, Institut Pasteur de Lille

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Abstract

In order to improve invasive pulmonary aspergillosis (IPA) diagnosis, a real-time polymerase chain reaction (PCR) assay detecting Aspergillus spp. was developed. Its detection limit reached 2–20 conidia. The retrospective evaluation on 64 bronchoalveolar lavage (BAL) fluids from 57 patients at risk for IPA, including 20 probable and five proven IPA patients, revealed a 88% or 38% sensitivity in direct examination (DE)/culture-positive or culture-negative BAL, respectively, whereas galactomannan (GM) sensitivity reached 88% or 58%, respectively. Influence on the Aspergillus-PCR yield of BAL fluid volume, cellular count and DNA content (evaluated by human β-globin quantification) was assessed. Significantly higher β-globin levels were detected in Aspergillus PCR-positive (median 5,112 pg/μl) than negative (median 1,332 pg/μl) BAL fluids, suggesting that the β-globin level could reflect BAL yields and DNA extraction. Using β-globin for the interpretation of fungal PCR could improve the negative predictive value of this test.